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焦磷酸測序（Pyrosequencing）技術
點擊次數：1019 發布時間：2015-9-16
焦磷酸測序(Pyrosequencing)技術是新一代DNA序列分析技術，該技術無須進行電泳，DNA片段也無須熒光標記，操作極為簡便。
Pyrosequencing技術是由4種酶催化的同一反應體系中的酶級聯化學發光反應（參見Pyrosequecing的原理），在每一輪測序反應中，只加入一種dNTP，若該dNTP與模板配對，聚合酶就可以將其摻入到引物鏈中并釋放出等摩爾數的焦磷酸基團（PPi）。
PPi可zui終轉化為可見光信號，并由PyrogramTM轉化為一個峰值。每個峰值的高度與反應中摻入的核苷酸數目成正比。然后加入下一種dNTP，繼續DNA鏈的合成。
焦磷酸測序(Pyrosequencing)技術瑞典Pyrosequencing AB公司基于Pyrosequencing技術而研究開發的PSQ 96系統是一個理想的遺傳分析技術平臺，它既可進行DNA序列分析，又可進行基于序列分析的SNP檢測及等位基因頻率測定。我公司是早引進PSQ 96 MA 技術平臺的公司之一，它具有以下優點：
不需要制膠，不需要毛細管，也不需要熒光染料和同位素。 10分鐘內可分析96個樣品的snp，可滿足高通量分析的要求。 每個樣品孔都可進行獨立的測序或SNP分析，實驗設計靈活。 序列分析簡單，結果準確可靠。
Pyrosequencing技術的原理
Pyrosequencing是一項全新的dna測序技術，可以快速、準確地測定一段較短的目標片段。其基本原理如下：
第1步：1個特異性的測序引物和單鏈DNA模板結合，然后加入酶混合物(包括DNA Polymerase、ATP Sulfurylase、Luciferase和Apyrase)和底物混合物(包括APS和Luciferin)。