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東曹(上海)生物科技有限公司

與傳統HPLC相比,UPLC具有哪些優勢?

時間:2016-5-25 閱讀:7927
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  與傳統的液相色譜(HPLC)相比,UPLC具有以下優勢:

  1.高分離度(ultra resolution)

  根據液相色譜分離的解析度方程,解析度正比于柱效能的平方根

  而根據范迪姆特(Van Deemter)色譜理論,柱效反比于系統固定相粒度大小。UPLC系統運用的固定相粒度能達到1.7μm,根據上述方程,該系統達到的效能將比5μm粒度系統高70%,而比3.5μm高40%。

  2. 高速度(ultra speed)

  在保證得到同樣質量數據的前提下,UPLC能提供單位時間內更多的信息量。在不影響解析度的的情況下,小粒度能提供更高的分析速度,同樣也能使柱長減少,根據Van Deemter色譜理論,*流速反比于粒度大小。

  例如,運用1.7μm的顆粒,相對于5μm顆粒,在不影響柱效的情況下,柱長將可以立方級的減少,而且可以在3倍的流速下運行,相同的解析度情況下,分離速度提高了9倍。

  3. 靈敏度(sensitivity)

  過去對于提高靈敏度的研究大都集中于檢測器上,不論是光學檢測器還是質量檢測器。但是,其實運用UPLC也能提高分析的靈敏度。

  UPLC能提高柱效N,從而使峰寬w變的更窄,而峰高卻增加了,同時,由于UPLC運用了更短的柱子(柱長L更小),進一步增加了峰高。因此,在提高柱效的同時,運用1.7μm的UPLC系統比5μm和3.5μm的系統靈敏度分別提高了70%和40%,而在柱效下相同情況下,能分別提供3倍和2倍的靈敏度。

  在儀器工藝方面,Waters ACQUITY UPLC采用了新型的色譜填料及裝填技術,配備了的超高壓液相色譜泵、自動進樣器、高速檢測器,并優化了系統的綜合設計,使儀器分析能力大大增強。

  由于UPLC是一個新興的領域,與傳統的HPLC相比,UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。目前,UPLC多應用于代謝組學分析及其他一些生化領域,在天然產物的分析方面運用也逐漸興起,因為在這些領域深入研究需要更高的分析精度。使用UPLC與Q-Tof-MS或trap-tof-MS等質譜檢測器連接,對天然產物分析,特別是中藥研究領域的發展將是一個極大的促進。

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