會(huì)員.png)
10
當(dāng)前位置：東曹（上海）生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>凝膠色譜法的凝膠種類及性質(zhì)
凝膠色譜法的凝膠種類及性質(zhì)
（一）聚丙烯酰胺凝膠
聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位， 由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的，經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠。交聯(lián)劑越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠－P （Bio-Gel P），由日本tosoh的TSKGEL的pw系列，適合蛋白和多糖的純化。即丙烯酰胺和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺，在催化劑過硫酸銨作用下聚合形成凝膠。
聚丙烯酰胺（PAM，polyacrylamide）
聚丙烯酰胺簡稱PAM，分子量100～500萬。聚丙烯酰胺主要有兩種商品形式，一種是粉末狀的，另一種是膠體，還有聚丙烯酰胺乳液 (上海合成樹脂研究所研制) 。易溶于冷水，速度很慢，高分子量的聚丙烯酰胺當(dāng)濃度超過10％以后．就會(huì)形成凝膠狀結(jié)構(gòu)。提高溫度可以稍微促進(jìn)溶解，但溫度不得超過50℃，以防發(fā)生分子降解。難溶于有機(jī)溶劑。溫度超過120 ℃時(shí)分解。中性，無毒。用作增稠劑、絮凝劑、減阻劑，具有凝膠、沉降、補(bǔ)強(qiáng)等作用。貯存于陰涼、通風(fēng)、干燥的庫房內(nèi)，防潮、避光、防熱。存放時(shí)間不宜過長。
（二）交聯(lián)葡聚糖凝膠（Sephadex）
⑴ Sephadex G 交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephndex，不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如，G-25為每克凝膠膨脹時(shí)吸水2.5克，同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。因此，“G”反映凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分部范圍。
⑵ Sephadex LH-20，是Sephadex G-25的羧丙基衍生物，能溶于水及親脂溶劑，用于分離不溶于水的物質(zhì)。
（三）瓊脂糖凝膠
瓊脂糖 Agarose，縮寫為 AG，是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份，也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學(xué)結(jié)構(gòu)由β-D-吡喃半乳糖 (1-4) 連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構(gòu)成。
把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶于熱水，冷卻制成的凝膠。制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級(jí)分離的大分子的凝膠過濾，若使用5％以下濃度的凝膠，也能夠分級(jí)分離細(xì)胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點(diǎn)，有時(shí)用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。
瓊脂糖凝膠商品名很多，常見的有，Sepharose（瑞典，pharmacia ），Bio-Gel-A（美國，Bio-Rad）等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下，它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的，可以在許多條件下使用
凝膠色譜法（如水，pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液）。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化，也不能高壓消毒，可用化學(xué)滅菌活處理。
（四）聚苯乙烯凝膠
商品為Styrogel，具有大網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)，可用于分離分子量1600到40，000，000的生物大分子，適用于有機(jī)多聚物，分子量測(cè)定和脂溶性天然物的分級(jí)，凝膠機(jī)械強(qiáng)度好，洗脫劑可用甲基亞砜。