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相稱顯微鏡是做什么的？
閱讀：602 發(fā)布時間：2019-6-19
相稱顯微鏡是一種增加對比度的方法。可以在不染色的情況下看到活體細胞。
相稱顯微鏡，又叫相差顯微鏡（Phase contrast microscopy ）。相差是一種增加對比度的方法，可以在不染色的情況下看到活體細胞。
相稱顯微鏡是一種利用光的衍射和干涉現(xiàn)象將透過標本的光線光程差或相位差轉換成肉眼可分辨的振幅差顯微鏡。提高了密度不同物質圖像的明暗區(qū)別，可用于觀察未經染色的細胞結構。
位相差顯微鏡的原理為何？如何調整？
相差成像
人的眼睛能夠識別明與暗之差（光的強度）和顏色不同（光的波長不同），但難以識別差別小的無色的透明物體。
光對無色透明物體（相位物體）并不引起明、暗和顏色的變化，而只產生所謂的相位差。可是這種相位差不能用肉眼識別，也就看不見這種相位物體了。
相差顯微鏡利用阿貝成像原理，把相位資訊轉化為振幅資訊，是觀察透明物體的關鍵。
光路原理
相差光路重要兩個元件是環(huán)形光闌和相位板
環(huán)形光闌：不同的環(huán)狀孔形成的光闌，它們的直徑和孔寬是與不同的物鏡相匹配的。由于透明圓環(huán)所成的像恰好落在物鏡后焦點平面和相板上的共軛面重合。因此，未發(fā)生偏斜的直射光便通過共軛面。其作用是將直射光所形成的像從一些衍射旁像中分出來。
相位板：安裝在物鏡的后焦面處，相板裝有吸收光線的吸收膜和推遲相位的相位膜。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外，還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用。
利用位相差聚光鏡及內部位相環(huán)所構成的環(huán)狀光圈，產生中空光錐通過聚光鏡、穿過檢體，經過物鏡內的光延遲位環(huán)板而成，因檢體折射指數(shù)不同，造成繞射光束與直射光束發(fā)生干涉作用，得到明暗對比的效果。調整位相差裝置，先選擇聚光鏡上與物鏡相同倍率之位相差環(huán)，所形成的亮環(huán)與物鏡內的暗環(huán)配合，調整聚光鏡上亮環(huán)，使之重疊即可。
位相稱顯微鏡應用
主要提供胚胎形態(tài)的觀察、胚胎級數(shù)的判別等特殊功用。解剖顯微鏡，提供睪丸取精之后，切取組織搜尋精子或采卵時搜尋卵子，因此臨床應用于：
●觀察卵子及胚胎的發(fā)育情形。
●輔助胚胎植入前診斷之細胞核固定。
●精蟲顯微注射之應用操作。
●胚胎輔助孵化之應用操作。
相稱顯微鏡的優(yōu)勢：
我們一般用普通顯微鏡觀察試樣的顯微鏡組織，是靠試樣表面反射光的強弱（即黑白灰度的不同）來鑒別它。
有的顯微鏡組織由于其反射率和吸收率的不同而產生不同的灰度。反射率較大者，則組織較明亮：反射率較小者，組織比較灰暗。
當試樣上兩相的反射系數(shù)相同，僅有因輕微侵蝕或各相硬度不同而使拋光時形成微小凹凸，或者有塑料性變形及第二類共格差別。
對此一般生物顯微鏡明場就不易鑒別，當表面高低起伏極小時，更難辨別，而相稱技術成功地解決了這一問題。一般表面高低差在100～1500Ao(1Ao=0.1NM)范圍內均能用相稱顯微鏡來觀察。