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如何選擇生長(zhǎng)因子試劑盒?靈敏度、特異性與交叉反應(yīng)考量

閱讀:55      發(fā)布時(shí)間:2025-7-17
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  在選擇生長(zhǎng)因子試劑盒時(shí),需圍繞靈敏度、特異性和交叉反應(yīng)三大核心指標(biāo),結(jié)合實(shí)驗(yàn)需求與樣本類型進(jìn)行綜合評(píng)估,具體選擇策略如下:
  1.靈敏度:匹配檢測(cè)下限需求
  靈敏度是試劑盒檢測(cè)低濃度生長(zhǎng)因子的能力,以最小可檢測(cè)濃度(如<1pg/mL)或空白對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)差3倍值為標(biāo)準(zhǔn)。例如,檢測(cè)血清中低豐度生長(zhǎng)因子(如FGF19,檢測(cè)范圍7.5-240pg/mL)時(shí),需選擇靈敏度<1pg/mL的試劑盒;若樣本濃度較高(如VEGF,檢測(cè)范圍4.7pg/mL-300pg/mL),可選擇靈敏度稍低但成本更優(yōu)的產(chǎn)品。
  2.特異性:規(guī)避非目標(biāo)干擾
  特異性指試劑盒僅識(shí)別目標(biāo)生長(zhǎng)因子的能力,需通過抗體類型與交叉反應(yīng)評(píng)估。優(yōu)先選擇單克隆抗體試劑盒(如HGF試劑盒交叉反應(yīng)率<0.1%),避免與同家族蛋白(如EGF與TGFα)或血清干擾物(如異嗜性抗體)結(jié)合。若檢測(cè)物種非人源(如大鼠VEGF),需確認(rèn)抗體與目標(biāo)物種蛋白匹配,防止種屬交叉反應(yīng)。
  3.交叉反應(yīng):排除結(jié)構(gòu)類似物干擾
  交叉反應(yīng)是試劑盒與非目標(biāo)分子結(jié)合導(dǎo)致的假陽(yáng)性,需通過說明書或臨床試驗(yàn)報(bào)告確認(rèn)。例如,TGF-β1試劑盒需明確不與胰島素原、LH等物質(zhì)反應(yīng);IGF-1試劑盒需在膽紅素(200mg/L)、脂血(3000mg/dL)等干擾物存在時(shí)保持結(jié)果穩(wěn)定。若樣本含高濃度鉤狀效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)(如HGF>1000ng/mL),需選擇支持稀釋復(fù)測(cè)的試劑盒。
  4.實(shí)驗(yàn)需求與樣本類型適配
  根據(jù)樣本類型(血清、血漿、細(xì)胞上清等)選擇兼容試劑盒。例如,細(xì)胞上清需離心去除顆粒后檢測(cè);組織勻漿需用PBS稀釋并超聲破碎。若需高通量檢測(cè),優(yōu)先選擇96T規(guī)格試劑盒;若樣本量有限,可選擇48T規(guī)格以減少浪費(fèi)。

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