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影響人ELISA試劑盒檢測主要原因

閱讀:106          發布時間:2016-10-6

由于人ELISA試劑盒方法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。
標本的影響
溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),人ELISA試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態氧(O),從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色,產生假陽性[2]。所以嚴重溶血標本禁用。
標本受細菌污染。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。
標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,人ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。
標本凝固不全。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,ELISA試劑盒常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
Profilin 1    前纖維蛋白1抗體                
PCNA-Proliferation Marker    增殖細胞核抗原抗體                
phospho-FAK(Tyr925)    磷酸化粘著斑激酶抗體                
phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577)    磷酸化粘著斑激酶抗體                
phospho-PAK1(Thr212)    磷酸化p21激活激酶1抗體                
Phospho-PDPK1(Tyr9)    磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體            Phospho-PDPK1(Ser396)    磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體           Phospho-PDPK1(Ser410)    磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體           Phospho-PLC gamma 1(Tyr775)    磷酸化磷酯酶Cγ1抗體                
Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)    磷酸化磷酯酶Cγ2抗體                
Phospho-Paxillin(Tyr88)    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體                
Phospho-Paxillin(Ser83)    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體                
Phospho-Paxillin(Ser178)    磷酸化樁蛋白Paxillin抗體                
phospho-PKC beta 1/2(Thr500)    磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗體   PGRMC    孕激素受體膜相關元件抗體                
Phospho-p63 (Ser395)    磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體  
人ELISA試劑盒     

 

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