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ELISA試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用
閱讀：104 發(fā)布時(shí)間：2014-8-8| 提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 2.7KB |
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ELISA試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用
可用作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清 、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。
大部分ELISA試劑盒檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，ELISA試劑盒檢測(cè)試劑盒超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清
融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體 效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，ELISA試劑盒也可加入適當(dāng)防腐劑（見3.2.4）。
按試劑盒說(shuō)明書的的試劑。ELISA試劑盒中用的蒸餾 水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。ELISA試劑盒每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀的血清，可在試管 中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。