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做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節(jié)問題
閱讀：223 發(fā)布時間：2015-3-18用于免疫檢測的所謂“標準曲線"其實稱為擬合曲線比較合適。ELISA標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果，甚至是關系到實驗的成敗。在今天的文章中，上海撫生技術員為您總結出：做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節(jié)問題，一起來看下。
1.設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
2.檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
3.標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。
4.做出的標準曲線相關系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f，相關系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。
5.樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。
6.采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。