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人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:

1.  以稀釋液將待檢標(biāo)本做適當(dāng)稀釋?zhuān)A(yù)試中確定）加入包被有已知抗原的酶標(biāo)板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。

2.  棄反應(yīng)液，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干。

3.  加入酶標(biāo)抗體（濃度在預(yù)試中確定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。

4.  重復(fù)第2步。

5.  加底物（濃度在預(yù)試中確定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時(shí)觀察，顯色滿(mǎn)意后加終止液50ul/孔。

6.  于酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，OPD用492nm測(cè)定，TMB用450nm測(cè)定。
人ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：

（1）特異性高：進(jìn)行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差。

（2）精度高：通過(guò)加標(biāo)回收率和線(xiàn)性稀釋實(shí)驗(yàn)，確保樣本值的準(zhǔn)確性，度高于同類(lèi)產(chǎn)品（較低的CV%）。

（3）重復(fù)性好：lot-to-lot檢測(cè)確保zui小的批間差異。 

（4）可靠性強(qiáng)：經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽(yáng)性和假陰性試驗(yàn)結(jié)果。 

（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：在保證數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測(cè)范圍，以滿(mǎn)足需求。 

（6）價(jià)格低廉：*試劑，國(guó)內(nèi)分裝配置，大大減少了客戶(hù)因?yàn)閮r(jià)格高而必須購(gòu)買(mǎi)國(guó)產(chǎn)試劑盒的顧慮。

人ELISA試劑盒注意事項(xiàng):

1.  每次實(shí)驗(yàn)均應(yīng)做陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及空白對(duì)照（以PBS代替標(biāo)本），后者為本底值，在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)扣除本底值，陽(yáng)性對(duì)照<陰性對(duì)照<空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)成立。

2.  一般認(rèn)為小分子抗原宜用本法檢測(cè)，而大分子抗原則宜采用夾心法檢測(cè)，但具體宜采用哪種方法應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)決定，本發(fā)與夾心法相比在操作上減少一步。包被抗體與酶標(biāo)抗體如果分別采用單克隆抗體和多克隆抗體時(shí)，宜用單克隆抗體作為包被抗體，以多克隆抗體作為酶標(biāo)抗體。

3.  血清標(biāo)本中抗原濃度一般較低，故一般用原倍標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，必要時(shí)可進(jìn)行稀釋測(cè)定，但應(yīng)重新摸索酶標(biāo)抗原的濃度，以確保方法的靈敏性。

4.  以酶標(biāo)記抗原的方法同酶標(biāo)記抗體。

5.  其它注意事項(xiàng)同酶聯(lián)免疫間接法。