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判定ELISA試劑盒試驗(yàn)的成果方法
閱讀：312 發(fā)布時(shí)間：2020-5-18要完結(jié)一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn)，不但要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備，還要熟練掌握操作方法及技巧，后便是實(shí)驗(yàn)的成果了。那么ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的成果怎么判別剖析呢？
1.儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y)，相應(yīng)的IFN-Y標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)，做得相應(yīng)的曲線，樣品的IFN-Y含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；
ELISA試劑盒或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
3.檢測(cè)值范圍：0-400pg/ml
4.敏感度：1.0pg/ml
ELISA的實(shí)驗(yàn)成果可用肉眼觀察顏色反應(yīng)的深淺作出判別，也可用分光光度計(jì)作測(cè)定。當(dāng)然，后者更為正確。而肉眼觀察更為簡(jiǎn)潔，而且也有必定正確性。據(jù)Adler(1980)報(bào)告，目測(cè)為±1+、2+、3+、4+相當(dāng)于分光光度計(jì)測(cè)定O.D值。
不管用哪種方法判定成果，每次都要有陽(yáng)性和陰性參考血清作對(duì)照，這樣可以消除一些外界的影響要素。