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技術(shù)文章

人ELISA試劑盒說明書檢測(cè)原理

閱讀:565          發(fā)布時(shí)間:2017-11-24

人ELISA試劑盒檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和酶標(biāo)工作液加入到預(yù)先包被人白介素1(IL-1)抗體的透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入顯色劑A、B液,顯色劑(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人白介素1(IL-1)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中人白介素1(IL-1)含量。
操作步驟
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL;空白對(duì)照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
7、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
9、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
人ELISA試劑盒豬瘟抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Pig Anti-CSFV Antibody IgM ELISA Kit
豬瘟抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Classical Swine Fever Virus Antibody IgG ELISA Kit
豬胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)ELISA Kit    英文名:    Pig oxyntomodulin,OXM ELISA kit
豬偽狂犬病毒(PRV)抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Pig pseudorabies virus(PRV)antibody(IgG)ELISA kit
豬維生素D(VD)ELISA Kit    英文名:    Pig Vitamin D,VD ELISA kit
豬鐵蛋白(FE)ELISA Kit    英文名:    Pig ferritin,FE ELISA Kit
豬糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit    英文名:    Pig Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit
豬胎球蛋白A(FetuinA)ELISA Kit    英文名:    Pig Fetuin A ELISA Kit
豬胎盤生長(zhǎng)因子(PGF)ELISA Kit    英文名:    Pig Placenta growth factor,PGF ELISA kit
豬水通道蛋白4(AQP-4)ELISA Kit    英文名:    Pig Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit
豬水通道蛋白1(AQP-1)ELISA Kit    英文名:    Pig Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit
豬雙氫睪酮(DHT)ELISA Kit    英文名:    Pig Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
豬輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Pig transfusion transimitted virus/Hepatitis H virus antibody(IgG)ELISA Kit
豬生長(zhǎng)抑素受體5(SSR5)ELISA Kit    英文名:    Pig Somatostatin receptor 5,SSR5 ELISA Kit
豬生長(zhǎng)激素抑制素受體5(SSTR5)ELISA Kit    英文名:    Pig Somatostatin receptor type 5,SSTR5 ELISA kit
豬生長(zhǎng)激素受體(GHR)ELISA Kit    英文名:    Pig growth hormone receptor,GHR ELISA Kit
豬生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)ELISA Kit    英文名:    Pig Growth/differentiation factor 9,GDF9 ELISA kit
豬腎素(Renin)ELISA Kit    英文名:    Pig Renin ELISA Kit
豬神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA Kit    英文名:    Pig Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit
豬神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA Kit    英文名:    Pig Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit    英文名:    Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
豬色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit    英文名:    Pig pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
豬三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit    英文名:    Pig Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit    英文名:    Pig Lactoferrin,LF/LTF ELISA kit
豬乳酸脫氫酶(LDH)ELISA Kit    英文名:    Pig lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)ELISA Kit    英文名:    Pig Heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
豬熱休克蛋白60(HSPD1/Hsp-60)ELISA Kit    英文名:    Pig 60 kDa heat shock protein,mitochondrial(HSPD1)ELISA kit
豬去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA Kit    英文名:    Pig deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit
豬趨化因子配體28(CCL28)ELISA Kit    英文名:    Pig chemokine(C-C motif)ligand 28(CCL28)ELISA kit
豬前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA Kit    英文名:    Pig prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit人ELISA試劑盒

 

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