成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

行業產品

當前位置:
北京雷泰儀器有限公司>>技術文章>>實時熒光定量pcr儀技術原理

實時熒光定量pcr儀技術原理

閱讀:1213        發布時間:2022-1-17
 實時熒光定量pcr儀,由熒光定量系統和計算機組成,用來監測循環過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過開發的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環數的圖表。原始數據收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平,這就是分析熒光數據的水平。
 
技術原理
所謂real-time Q-PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基因,利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發展過程中,兩個重要的發現起著關鍵的作用:(1)在90年代早期,TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發現,它能降解特異性熒光記探針,因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。(2)此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。這兩個發現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發展導致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運用。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數方式增加的,隨著反應循環數的增加,終PCR反應不再以指數方式生成模板,從而進入平臺期。在傳統的PCR 中,常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測PCR反應的終擴增產物,因此用此終點法對PCR產物定量存在不可靠之處。在real-time Q-PCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的監測和連續地分析擴增相關的熒光信號,隨著反應時間的進行,監測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲 線。在PCR反應早期,產生熒光的水平不能與背景明顯地區別,而后熒光的產生進入指數期、線性期和終的平臺期,因此可以在PCR反應處于指數期的某一點 上來檢測PCR產物的量,并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進行比較,在real-time Q-PCR反應的指數期,首先需設定一定熒光信號的域值,一般這個域值(threshold)是以PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號 (baseline),熒光域值的缺省設置是3~15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號,它可用于定義 樣本的域值循環數(Ct)。Ct值的含義是:每個反應管內的熒光信號達到設定的域值時所經歷的循環數。研究表明,每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的 對數存在線性關系,起始拷貝數越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線,因此只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標準曲線上計算出該樣 品的起始拷貝數。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
二維碼 意見反饋
在線留言
主站蜘蛛池模板: 亚洲精品欧美日韩专区免费| 在线播放在线观看影视| h嗯小臊货好涨| 欧美日韩国产综合| 欧美午夜一区二区三区精品| 爱啪网亚洲第一福利网站| 亚洲看片无码在线视频| 国产日韩精品一区二区| 亚洲欧美日韩一区二区在线| 中出内射颜射骚妇| 国产亚洲福利精品| 激情内射亚州一区二区三区爱妻| 99国产精品久久国产72| 欧美日韩国产手机在线视频| 91po国产在线精品免费观看| 97无码欧美熟妇人妻蜜桃天美| 伊人大香人妻在线播放| 欧美人与动牲交A精品| 国产麻豆精品传媒AV在线观看| 国产亚洲福利精品一区| 国产精品久久久久久久福利竹| 上位电影| 亚洲欧美日韩综合久久久| 黄网站色视频大全免费观看| 韩国电影年轻的妈妈4| 中文字幕亚洲一区| 国产在线精品视频资源| 趴下来让老子爽死你老师视频| 日韩精品欧美中文字幕| 欧美日韩亚洲一二三区| 欧州又粗又大又长八A片| 产精品视频在线观看免费| 精品无码AV在线观看APP| 一边做一边说国语对白| 91精品国产综合久久福利| 国产亚洲精品久久久久久久| 在线观看日韩中文字幕| 91情侣偷在线精品国产| 无码乱人伦一区二区亚洲| 欧美黑人巨大性生话| 亚洲免费人妻视频诱惑|