核糖核酸酶A， RNase A

核糖核酸酶A是內(nèi)切核糖核酸酶，可特異地攻擊RNA上嘧啶殘基的3'端，切割與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵。反應(yīng)終產(chǎn)物是嘧啶3'磷酸及末端帶嘧啶3'磷 酸的寡核苷酸。無輔因子及二價(jià)陽離子存在時(shí)，核糖核酸酶A的作用可被胎盤RNA酶抑制劑（B1ackburn et al．1977）或氧釩—核糖核苷復(fù)合物（Puskas et al．1982）所抑制。

用途： 　　

（1）從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區(qū)。 　　

（2）確定DNA或RNA中單堿基突變的位置（Myers et al．1985，Winter et al．1985）。 在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯(cuò)配可被RNA酶A識(shí)別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒，在體外合成與野生型 DNA或RNA互補(bǔ)的32p標(biāo)記RNA探針，然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火， 所產(chǎn)生的單堿基錯(cuò)配可用RNA酶A切割，通過凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯(cuò)配的位置。在所有各種可能的單堿基錯(cuò)配中，大約50％可用此法確定。