核酸蛋白 全能檢測(cè)
如果你還不知道熒光定量PCR儀可以用來(lái)做蛋白檢測(cè)和分析，
那你就是“奧特曼”啦！
如果你正好在開(kāi)展蛋白尤其是膜蛋白相關(guān)的科研工作，
那么恭喜你，
你又可以多一個(gè)好使的研究工具啦！
它就是新一代全光譜熒光定量PCR儀
qTOWERiris系列
全光譜檢測(cè)，拓展蛋白應(yīng)用
qTOWERiris突破性地將檢測(cè)光譜范圍拓寬到了波長(zhǎng)更短的紫外光區(qū)域，覆蓋從近紫外UVA到近紅外NIR的全光譜范圍，波長(zhǎng)從360nm到730nm。這一革新性的變化，大大擴(kuò)展了熒光定量PCR儀的應(yīng)用場(chǎng)景。
1、 近紫外光區(qū)域的核酸檢測(cè)應(yīng)用，為做核酸多重檢測(cè)的用戶提供了更多的選擇，比如可以檢測(cè)ATTO390、ATTO425核酸標(biāo)記熒光染料的信號(hào)；
2、 蛋白檢測(cè)方面的應(yīng)用，比如說(shuō)可以利用蛋白熔解曲線分析功能，開(kāi)展CPM、ANS等熒光染料標(biāo)記的蛋白熱穩(wěn)定性檢測(cè)、蛋白與配體互作研究、蛋白結(jié)晶和儲(chǔ)存體系優(yōu)化等；
在蛋白相關(guān)研究中，膜蛋白以其強(qiáng)大的功能性和生物學(xué)活性，成為非常重要的研究靶點(diǎn)，如細(xì)胞的增殖和分化、能量轉(zhuǎn)換、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)龋寂c膜蛋白息息相關(guān)，而且估計(jì)有60%左右的藥物作用都與膜蛋白有關(guān)。
由于在膜蛋白樣品制備過(guò)程中，需要用到一定濃度的表面活性劑，來(lái)使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態(tài)下膜蛋白結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性，因此膜蛋白樣品溶液中往往含有較多的表面活性劑。如果用普通的熒光染料如SYPRO Orange去標(biāo)記膜蛋白，因其溶解性不好、背景噪音高而達(dá)不到好的檢測(cè)效果,此時(shí)如果換成CPM熒光染料（C24H22N2O4）就能很好地實(shí)現(xiàn)膜蛋白熔解曲線檢測(cè)和分析。
CPM的激發(fā)光Ex為384nm，檢測(cè)光Em為470nm，在近紫外區(qū)域，那么問(wèn)題來(lái)了，普通的熒光定量PCR儀，激發(fā)光譜往往從450nm左右的藍(lán)光區(qū)域開(kāi)始，沒(méi)有辦法實(shí)現(xiàn)CPM的檢測(cè)。而耶拿公司的qTOWERiris的紫外通道，檢測(cè)光譜正好匹配CPM染料，很好地滿足了CPM標(biāo)記的膜蛋白的高靈敏度檢測(cè)。
除了CPM熒光染料，ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）也是一種常用的蛋白標(biāo)記熒光染料，和蛋白的結(jié)合性好，本底低。ANS的激發(fā)光Ex為380nm，檢測(cè)光Em為470nm，也正是位于qTOWERiris紫外通道的檢測(cè)范圍。因此，qTOWERiris能為開(kāi)展蛋白研究的用戶提供非常方便的熔解曲線分析，進(jìn)而快速獲得蛋白熱穩(wěn)定性、蛋白和小分子互作、蛋白結(jié)晶條件優(yōu)化等方面的信息。
典型的蛋白熔解曲線結(jié)果：
圖1. 蛋白熔解曲線原始信號(hào)圖
圖2. 蛋白熔解曲線峰值圖
?qTOWERiris還能為您帶來(lái)可靠的檢測(cè)結(jié)果和人性化的使用體驗(yàn)。
溫控精準(zhǔn)，重復(fù)性好
延續(xù)了耶拿PCR儀經(jīng)典的鍍金純銀樣品槽和快準(zhǔn)穩(wěn)的高速PCR技術(shù)，最大升溫速率可達(dá)8℃/s，溫度準(zhǔn)確性±0.1℃，精準(zhǔn)的溫控是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確熔解曲線分析的重要前提，再結(jié)合先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，不存在樣品間的邊緣效應(yīng)，提供更好的檢測(cè)重復(fù)性。
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