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色譜裝柱機應用及工作原理

閱讀:863      發布時間:2016-10-31
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色譜裝柱機應用及工作原理
 
以填裝5um 硅膠 4.6×250 分析柱為例
連接裝柱所需空壓機和色譜裝柱機,確保裝柱機工作時機身穩固;
稱取填料3.0-3.5g (4.6×250 分析柱標準需要2.8g,經驗3.2g比較合適);
用40-50ml異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)溶解填料,用玻璃棒攪拌均勻后用超聲波超3分鐘, 以確保其分散性;
迅速將上述混合液倒入勻漿罐(盡量短時間內完成該工序并確保勻漿罐內無氣泡),如勻漿罐不滿再用異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)補滿,理想情況是不需要再補充異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1),熟練后可知需要多少原料,所需原料的梁與溫度、填料溶解性有關;
迅速將勻漿罐和柱子連接到泵上以60MPA的壓力,以甲醇(化學純)做流動相開啟裝柱機,保持裝柱機在60MPa壓力下工作20分鐘;
減壓至30MPa運行5-10分鐘,緩慢降壓至系統無壓力靜止3分鐘;
卸下柱子看柱頭部分是否平整,如不平整用美工刀鏟平(很需要技術的步驟);
將柱子接入液相色譜儀,用甲醇(色譜級)以1.0流速運行30分鐘;
開始檢驗色譜柱效;
多次熟練此工作,以提高裝柱質量。

備注: 異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)至少分析純;
甲醇為控制成本可用化學純,但事先需要經過0.2um有機濾膜過濾;
工作開始前開啟裝柱機用流動相甲醇沖洗管路,盡量確保管路中無氣泡。

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