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熒光全功能分光光度計在RNA質(zhì)控的應(yīng)用

時間:2023/6/3閱讀:1051
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對于每天泡在實驗室的人來說,qPCR已是家常便飯。毫無疑問濃度高,純度好,片段完整,才是我們理想中的RNA樣品。然而,RNA總是嬌氣的存在!室溫或4度極易降解,提取的時候容易有污染物殘留。因此完整的RNA質(zhì)控包含了三個方面:濃度質(zhì)控,純度質(zhì)控,片段完整性質(zhì)控。
 
如何把控RNA質(zhì)量,繼續(xù)反轉(zhuǎn)錄呢?
 
有一款RNA質(zhì)控的高手,既可以提供RNA濃度質(zhì)控,也可以提供RNA純度質(zhì)控,沒錯,就是美國Denovix公司提供的DS-11FX超微量紫外/熒光全功能分光光度計,看上去酷酷的


RNA純度質(zhì)控的標準方法是超微量分光光度計(光吸收)法,通過監(jiān)控A260/230和A260/280的比值來判定RNA的純度。通常A260/280的比值范圍在1.8-2.0之間,如果大于2.0則說明RNA已經(jīng)降解,如果低于1.8則說明含有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì);而A260/230的比值如果小于2,則表明RNA中含有酚類,鹽等雜質(zhì)。DS-11FX的微量光度計功能可以幫助科研人員來準確的判定RNA樣品的純度。
 
下圖為RNA紫外法檢測示意圖,A260/280和A260/230都不在正常的比值范圍,說明RNA樣品純度很差,儀器會自動進行提示,兩個黃色小三角就是警示圖標哦,點擊萌萌的黃色三角警示,儀器會顯示污染物的種類,夠智能吧,這就是DS-1有的SmartQC功能

 
RNA濃度質(zhì)控的標準方法是熒光法,除非是純度很高的RNA也可以采用紫外法。熒光法采用RNA特異性染料,可以準確的測量RNA濃度。DS-11FX不但提供RNA濃度質(zhì)控,也可以提供DNA和蛋白的濃度精確控制,功能超級強大哦。


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