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中級(jí)會(huì)員 | 第22年

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全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測序中的應(yīng)用

時(shí)間:2023/5/27閱讀:750
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細(xì)胞計(jì)數(shù)采用的方法?
傳統(tǒng)方法:臺(tái)盼藍(lán)染色法
臺(tái)盼藍(lán)染色是對(duì)死活細(xì)胞進(jìn)行分別計(jì)數(shù)的方法之一,染色原理是臺(tái)盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色;而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜損傷,染料透過細(xì)胞膜在細(xì)胞內(nèi)富集而使細(xì)胞著藍(lán)色。不過,臺(tái)盼藍(lán)染色并不一定能準(zhǔn)確分辨有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片,因此它往往低估細(xì)胞總數(shù)而高估細(xì)胞活力。

熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色原理:活細(xì)胞經(jīng)AO染色發(fā)出綠色熒光,而死細(xì)胞經(jīng)PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是,對(duì)背景復(fù)雜的細(xì)胞,比如說外周血單個(gè)核細(xì)胞,含有細(xì)胞碎片較多或成簇的細(xì)胞計(jì)數(shù),避免了細(xì)胞碎片的檢測。這種方法最近也應(yīng)用在單細(xì)胞基因組學(xué)應(yīng)用上,其中綠色對(duì)應(yīng)了完整細(xì)胞,而紅色對(duì)應(yīng)了成功分離的細(xì)胞核。這種策略讓研究人員能夠計(jì)算未裂解的殘留細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比,同時(shí)對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行計(jì)數(shù),提示樣本質(zhì)量,幫助研究人員確定是否繼續(xù)進(jìn)行單細(xì)胞基因組學(xué)流程。

全自動(dòng)熒光細(xì)胞分析儀
JSY-FL-045N型熒光細(xì)胞分析儀,明場+雙色熒光通道的結(jié)合使實(shí)驗(yàn)更加簡單快捷,同時(shí)還具備轉(zhuǎn)染檢測功能,更加拓寬了檢測的寬度。檢測細(xì)胞種類更加龐大,不僅適用于單純的培養(yǎng)細(xì)胞,對(duì)從組織中、骨髓中、外周血、肺泡中、肝臟中分離出的種類和來源差異較大的細(xì)胞標(biāo)本,也可以快速的計(jì)數(shù)和分析。通過熒光標(biāo)記技術(shù)和圖像分類識(shí)別技術(shù)對(duì)顯微獲取的熒光數(shù)字圖像自動(dòng)進(jìn)行分析,獲取細(xì)胞的死活狀態(tài)、凋亡情況以及實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分類。

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