操作步驟：

1、打開PCR儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。

2、打開PCR儀的電源，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘。

3、初始化完成后，顯示主菜單：

4、點(diǎn)“Browse/New Methods”，進(jìn)入PCR程序列表：

5、可以直接點(diǎn)一個(gè)PCR程序，選擇“Start Run”運(yùn)行；點(diǎn)右邊的符號(hào)，可以選 擇不同的文件夾。如要新建一個(gè)PCR程序，點(diǎn)“New”，出現(xiàn)PCR程序：

6、添加一段程序：點(diǎn)中上方的“Stage”位置，該位置變紅；再點(diǎn)“Add”，軟件將加入一段新的程序。

7、修改循環(huán)數(shù)、溫度、時(shí)間：點(diǎn)中循環(huán)次數(shù)、溫度或時(shí)間位置，下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵，出現(xiàn)合適數(shù)字后，點(diǎn)“Done”確定。

8、增加一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step”位置，該位置變紅；再點(diǎn)“Add”，軟件將加入一個(gè)新的步驟。

9、刪除一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step”位置，在點(diǎn)“Delete”，軟件將該步驟刪除。

10、建立梯度模式：

                    1）點(diǎn)中一個(gè)步驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下

                    2）點(diǎn)“VeriFlex step”，出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口：

輸入6個(gè)梯度溫度，溫度下方的“1－2”是指對(duì)應(yīng)的1、2兩行加熱孔，全部輸好后，點(diǎn)“Done”確定。注意：相鄰的兩個(gè)梯度溫度之差不能*過5℃！

11、建立漸變模式：

                    1）點(diǎn)中一個(gè)步驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下

                    2）點(diǎn)“Auto Delta”，出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口。

點(diǎn)“Staring Cycle”，輸入起始循環(huán)數(shù)；點(diǎn)“Delta Temperature”，輸入溫度變化值；點(diǎn)“Delta Time”，輸入時(shí)間變化值。漸變模式適用于touchdown PCR，可以提高PCR反應(yīng)的特異性。例：輸入起始循環(huán)數(shù)為2，溫度變化值為＋0.5℃，時(shí)間變化值為＋5s，則表示從第2個(gè)循環(huán)開始，每循環(huán)一次升溫0.5℃，時(shí)間增加5s。

12、增加暫停步驟：

                   1）點(diǎn)中一個(gè)步驟，再點(diǎn)“Option”鍵，出現(xiàn)選項(xiàng)如下

                   2）點(diǎn)“Pause”，出現(xiàn)如下窗口。

輸入暫停的起始位置，暫停間隔和暫停時(shí)間，點(diǎn)“Done”確定。上圖表示每隔10個(gè)循環(huán)暫停10s，在10個(gè)循環(huán)的第1個(gè)循環(huán)之前暫停。

13、編輯PCR程序完成后，點(diǎn)“Save”保存。

點(diǎn)“Run Method”，輸入PCR程序名稱；點(diǎn) ，選擇保存PCR程序的文件夾（如 果要保存在USB文件夾中，需要先插U盤）。再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度（這兩項(xiàng)在運(yùn)行程序時(shí)可以修改）。點(diǎn)“SaveδExit”確定。

14、回到PCR程序列表界面，選擇新建的PCR程序。

15、點(diǎn)“Start Run”，出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口

 輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度，點(diǎn)“Start Run Now”開始運(yùn)行PCR程序。

16、儀器運(yùn)行選中的PCR程序，顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口

                    A- 運(yùn)行狀態(tài)欄，顯示運(yùn)行溫度和剩余時(shí)間

                    B- 加熱警示標(biāo)記

                    C- 階段指示

                    D- 步驟溫度

                    E- 步驟時(shí)間

                    F- 步驟指示

                    C- 狀態(tài)報(bào)告，顯示日期、時(shí)間和儀器狀態(tài)

                    D- 延伸箭頭，點(diǎn)箭頭可以顯示更多的步驟 

16、暫停運(yùn)行：  點(diǎn)“Pause Run”，儀器暫停，出現(xiàn)暫停選項(xiàng)欄

  “Remaining Time”顯示暫停剩余時(shí)間，“Elapse Time”顯示已暫停時(shí)間。 

如果需要修改暫停時(shí)間，點(diǎn) ，輸入時(shí)間值，點(diǎn)“Done”確定；點(diǎn)“Resume Run”， 結(jié)束暫停，繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。

7、終止運(yùn)行：點(diǎn)“Stop”可以終止整個(gè)PCR程序。

18、反應(yīng)報(bào)告：

    PCR程序結(jié)束后，儀器會(huì)自動(dòng)生成反應(yīng)報(bào)告，顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項(xiàng)指數(shù)。該報(bào)告可以保存和打印。

19、PCR反應(yīng)結(jié)束后，打開熱蓋，取出樣品，關(guān)閉儀器電源。并開蓋放置，使熱蓋和加熱模塊正常降溫