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赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書

閱讀:1570          發(fā)布時間:2011-11-3
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      赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書

使用目的:
本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中赭曲霉素(Ochratoxin)殘留的定量檢測。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在微孔板包被有赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原,加入赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離赭曲霉素(Ochratoxin)與微孔條上預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原互相競爭抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)的含量。
試劑盒組成
1 預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。
2 赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0μg/ml,0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml
3抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。
4顯色液A:1瓶(6ml)。
5顯色液B:1瓶(6ml)。
6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
7樣本稀釋液:1瓶(10×,  6ml),用于樣品稀釋用。
8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
貯存
1 試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍
2 未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
注意事項(xiàng)
1 使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。
2 不要使用過期試劑盒。
3 試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
4 標(biāo)準(zhǔn)品中含有黃曲霉素,使用時應(yīng)特別注意,操作時應(yīng)帶手套。
5 終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6 不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗(yàn)結(jié)果。
7 不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
8 稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
9 混合試劑時應(yīng)避免起泡。
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
1取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
2強(qiáng)力振蕩3分鐘
3用Whatman 濾紙過濾
4取25µl處理后的樣品,加入25µl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
酶免分析步驟
1 實(shí)驗(yàn)須知
2實(shí)驗(yàn)開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時間約2小時。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的度和準(zhǔn)確度。
3使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
4請不要改變分析程序
5請使用的微量移液器
6操作一旦開始,請不要中斷任何程序
7ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請嚴(yán)格按照要求操作
8為避免交叉污染,每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
9 加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
10分析步驟
11預(yù)先進(jìn)行編號,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測
12取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
13樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
14在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
15在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
16在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
17在所有孔中加入50µl的抗黃曲霉素B1抗體酶結(jié)合物
18輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。
1937℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
20甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
21反應(yīng)
22洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻
23 37℃溫浴10min
24 每孔中加入50µl終止液,混勻
25 在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。

上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主要銷售ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品對照品,血清,抗體,生物試劑、培養(yǎng)基等科研試劑,保證質(zhì)量,價格合理,歡迎您(  )。

公司:http://www.gbdelisa.com

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