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上海恒遠生物科技有限公司>技術文章>豬瘟抗體ELISA實驗操作要領

技術文章

豬瘟抗體ELISA實驗操作要領

閱讀:1198          發布時間:2015-3-30

山東農業大學的趙老師于去年12月在我公司代測豬瘟抗體,白介素,干擾素等相關系列21個指標的ELISA實驗現需發表文獻特我公司關于豬瘟抗體等實驗的詳細操作流程,我司技術做出如下詳細解答

1.用包被液將豬瘟弱毒單抗純化聯抗原、豬瘟強毒單抗純化酶聯抗原各做100倍稀釋,每孔包被100μl4濕盒放置一夜。
2.次日取出,甩去孔內液體,3×3′沖洗。
3.將待檢血清以PBS液做400倍稀釋,每孔加100μl同時將豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋,于對照孔中加100μl37溫育1.5h2h
4.重復第二步,取出,甩去孔內液體,3×3′洗滌。
5.將兔抗豬IgG酶標抗體以PBS液做100倍稀釋,每孔加100μl37溫育1.5h2h
6.重復第4步。
7.每孔加底物溶液100μl,室溫下觀察顯色反應。當陰性對照孔稍顯色時,立即終止反應,并以陰性孔做空白對照。
8.每孔加終止液50μl立即于酶聯免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。
(三)結果判定
在豬瘟弱毒酶聯板上,OD≥0.2,為豬瘟弱毒抗體陽性;OD0.2,為豬瘟弱毒抗體陰性。
在豬瘟強毒酶聯板上,OD≥0.5,為豬瘟強毒抗體陽性;OD0.2,為豬瘟強毒抗體陰性。

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