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恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略
閱讀：314 發(fā)布時間：2025-3-12一、細胞基本信息
品牌名稱: 恒遠生物
產(chǎn)品貨號: HYCC20033
細胞名稱：CTLL-2
中文名稱：小鼠T淋巴細胞
種屬來源：小鼠
組織來源：T細胞
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
生長特性：懸浮生長
二、培養(yǎng)條件
氣相：95%空氣，5%二氧化碳
溫度：37℃
三、培養(yǎng)基與添加物
基礎培養(yǎng)基：RPMI-1640
添加物：10%特級胎牛血清（FBS）、100U/ml（或100IU/ml）IL-2、1%青霉素/鏈霉素（P/S）
注意，有些培養(yǎng)體系可能略有不同，但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
四、細胞培養(yǎng)步驟
1. 細胞復蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將解凍后的細胞懸液移至含5ml培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm離心5min。
棄去上清液，補加5mL培養(yǎng)基后吹勻，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中），培養(yǎng)過夜。
第二天換液并檢查細胞密度。
2. 細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時，進行傳代培養(yǎng)。
離心收集細胞（1000rpm，5-8min），棄去上清液。
補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中或6cm培養(yǎng)皿中。
對于較難培養(yǎng)的細胞或新手，可采用豎瓶培養(yǎng)法，逐步補加培養(yǎng)基，待細胞密度升高后再進行傳代。
3. 細胞凍存
選擇生長狀態(tài)良好的細胞進行凍存。
離心收集細胞（1000rpm，5-8min），去除上清液。
按凍存數(shù)量加入無血清細胞凍存液，輕輕混勻后，分裝入凍存管中（每管約1mL細胞懸液）。
將凍存管放入-80℃冰箱中過夜，然后轉(zhuǎn)入液氮罐中儲存。
五、培養(yǎng)注意事項
細胞接收與檢查：收到細胞后，首先檢查細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有異常，請及時與我司（恒遠生物）聯(lián)系。
無菌操作：在細胞培養(yǎng)過程中，應嚴格遵守無菌操作規(guī)程，避免細胞污染。
細胞密度監(jiān)控：定期觀察細胞生長情況，及時傳代以避免細胞密度過高導致死亡。
培養(yǎng)基更換：根據(jù)細胞生長情況和培養(yǎng)基顏色變化，適時更換新鮮培養(yǎng)基。
六、售后服務與細胞保存
若細胞在運輸或培養(yǎng)過程中出現(xiàn)問題，應及時與我司聯(lián)系并提供相關證據(jù)（如細胞照片、操作記錄等），以便進行售后處理。細胞應儲存在液氮罐中，避免反復凍融以確保細胞活性。
上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室，備有專業(yè)的技術研發(fā)團隊，長期致力于各種生物試劑，細胞，血清，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售，實驗提供免費代測服務，并提供技術服務，如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢，為您提供專業(yè)的一對一技術指導。