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技術文章

進口試劑盒講解ELISA法轉錄因子活性的特點與流程

閱讀:1596          發布時間:2014-4-1

    今天是四月份的*天,我們來給朋友們說說相關實驗方法,就是相關ELISA的,這個方法的試劑盒在我公司的產品中是非常齊全的,而且種屬也是繁多的。下面我們來看進口試劑盒講解ELISA法轉錄因子活性的特點與流程。
我們首先來看看特點:
1、靈敏度比凝膠遷移實驗高10倍。轉錄因子水平小的變化就能對細胞功能產生極大的影響,因此,在研究轉錄因子時采用靈敏的方法是非常重要的。
、特異性強。為了保證轉錄因子特異與生物素標記探針DNA結合,試劑盒提供了未標記寡核苷酸片段(含有與標記探針相同的轉錄因子結合位點)。此片段能夠與探針競爭結合轉錄因子,減弱信號強度。突變型的未標記寡核苷酸片段則不能與標記探針競爭結合轉錄因子改變信號強度。此外,抗轉錄因子一抗特異與轉錄因子結合,與其他蛋白無交叉反應,確保試劑盒的特異性。
3、快速。EMSA需要凝膠電泳,操作費時又不方便。使用轉錄因子活性ELISA檢測試劑盒,能夠在5h內得到結果。
4、方便、安全。不涉及放射性,不用電泳。
5、可同時檢測1~96個樣品。
6、能夠檢測組織及細胞樣品。
再一個就是流程:
1、核蛋白抽提物中轉錄因子與生物素標記探針結合形成轉錄因子/探針復合物。
2、轉錄因子/探針復合物與微孔板上鏈親和素結合固定在微孔板上。
3、抗轉錄因子一抗與轉錄因子結合。
4、HRP酶標二抗與一抗結合。
5、HRP作用于底物發生顏色改變,顏色深淺與轉錄因子DNA結合活性成正比。 
    由于ArrayStarTM轉錄因子活性ELISA試劑盒可以快速、靈敏地檢測細胞核提取物中轉錄因子的DNA結合活性。試劑盒采用96微孔板,標記探針是生物素標記的雙鏈寡核甘酸片段,含有轉錄因子的特異性DNA結合序列。當標記探針與細胞核抽提物一起孵育時,核抽提物中活性形式的轉錄因子與探針特異性結合,形成轉錄因子/探針復合物。隨后,轉錄因子/探針復合物與鏈親和素包被的微孔板孵育,轉錄因子/探針復合物通過與微孔板上鏈親和素結合,被固定在微孔板上。洗去未結合物,加入特異性一抗,然后加入HRP標記的二抗及底物,HRP催化底物發生顏色改變,根據顏色深淺即可檢測轉錄因子活性改變。轉錄因子活性ELISA方法是建立在ELISA基礎上的高靈敏度的檢測方法,也用于檢測哺乳動物組織或細胞中轉錄因子的DNA結合活性,比傳統凝膠遷移實驗的靈敏度高10倍,在5h內就能完成。不涉及放射性和凝膠電泳,安全簡便,而且這種微孔板的形式能同時檢測1—96個樣品。
    這里是上海恒遠,我公司的進口試劑盒是美國RD品牌的,質量有保證,而且價格也是非常合理的,您也可以隨時關注我公司動態,我公司每到節假都會開展回饋*活動來感謝您的支持。

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