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如何選擇免疫組化實驗中所需要的二抗
閱讀：3035 發(fā)布時間：2015-7-1免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。既然是抗體與抗原的反應，抗體就在實驗中顯得特別重要，如何選擇抗體就顯得很重要，今天上海恒遠與您一起分享一下如何選擇正確的二抗，進行免疫組化實驗。
1 種屬來源要匹配：根據所用一抗選定二抗。一般來說，如果一抗是小鼠源性，二抗應選擇兔/山羊或其它種屬抗小鼠的抗體。目前，美國Vector公司和 Zymed公司都有開發(fā)的用小鼠抗體檢測小鼠組織的試劑盒，即一抗來源于小鼠，該試劑盒采用了通用非特異性封閉液和封閉內源性小鼠Ig的封閉液，可以 得到清晰的染色背景。
2.注意抗體同種型和亞型：確定一抗同種型和亞型后，可以選擇抗一抗來源種屬廣譜Ig或針對一抗亞型的二抗。如一抗是小鼠IgG1，可以選用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。
3.正確使用：也需要重新選擇稀釋比例。一般上海恒遠會提供稀釋比例從1：10稀釋度始，作5倍比稀釋。
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