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技術文章

ELISA顯色淡原因的這些錯誤步驟你中招了嗎

閱讀:1676          發布時間:2015-4-1

    昨天下午,有位客戶致電我司業務員咨詢ELISA顯色淡的原因及解決方法。問題解決之后,我司業務員將具體內容整理出,在這里分享給大家。這些個造成ELISA顯色淡原因的這些錯誤步驟你中招了嗎?

● 可能原因

   1.試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;

   2.試劑盒未充分平衡;

   3.培養箱溫度不足37℃;

   4.保溫時間不足;

   5.洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加;

   6.移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔;

   7.蒸餾水水質有問題;

   8.底物作用時間不足。

● 解決方法

   1.盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫;

   2.試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃);

   3.注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意;

   4.校正定時鐘準確定時;

   5.按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數;

   6.校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,一次性使用;

   7.使用新鮮合格的蒸餾水;

   8.準確定時。

另外還有一個相關重點問題值得討論,上海恒遠技術員特別說明:①顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時間過短,結果偏低;②顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。

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