化工儀器網
技術文章
試劑空白有哪些不良現象
閱讀：1331 發布時間：2021-1-19試劑空白吸光度是反映試劑質量的指標之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質；如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變為紅色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉肽酶、淀粉酶等檢測試劑會因基質分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶等負反應，在放置過程中其試劑空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上，吸光度上升的反應，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限；相反，吸光度下降的反應，其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此，試劑空白吸光度限值，常作為程序參數輸入儀器，如經核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。需要指出的是，還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質的原料，往往需要加大用量，才使“表觀”吸光度上升，湊合過試劑空白核對的“關”，其后果為如下情況：
1.線性范圍變窄 現象：高值測不高。原因：生產試劑時有效成分投料量不足；試劑成份穩定性較差。
2.靈敏度變低現象：酶促反應速度曲線斜率下降，測定結果有嚴重系統誤差。原因：試劑底物濃度不足。
3.低值偏高 現象：試劑空白的變化曲線(吸光度VS時間)明顯波動。原因：試劑自身不穩定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導致干擾作用。