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技術講解:ELISA試劑盒標準曲線相關問題及解答

2016-7-13  閱讀(5363)

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                技術講解:ELISA試劑盒標準曲線相關問題及解答  

 

               

 
     實驗中,很多因素都能影響標準曲線的結果,其中就包括配制和操作。讓我們一起來看看吧!
我是否可以改變標準品的配制?
◆ 不可以。用的稀釋液適當稀釋的重組標準品如說明書中所示。
◆ 混合和溶解標準品時,應避免起泡。
◆ 溶解后的標準品靜置至少15分鐘(根據說明書)。在使用之前輕輕混勻,保證所有的固體已經溶解。
◆ 制作標準曲線時,確保所有的稀釋步驟已經準確完成。稀釋時注意及時更換槍頭。在移液之前將稀釋液充分混合。
elisa試劑盒洗滌方式怎樣影響我的標準曲線?
◆ 不*的洗滌會降低測定性,導致不理想的標準曲線結果。確保洗板機的正常工作,確保酶標板各孔被充分洗滌卻不干燥。
移液方式怎樣影響我的標準曲線?
◆ 不合理的移液操作會導致高CV值和不理想曲線。
◆ 在制作標準曲線的過程中,不正確的移液方式會導致錯誤的稀釋,從而使錯誤的數值進入標準曲線中,或者產生非線性曲線。確保移液器正常工作。每孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當所致。
ELISA試劑盒測定多個酶標板時是否可以使用同一條標準曲線?
◆ 在測定不同板中的樣品時,每一個板都對應一條標準曲線。技術錯誤或者不同的孵育情況,環境條件都會引起酶標板之間產生不同結果。一條標準曲線測定的樣品值必需是在相同環境下產生的,否則就是無效值。

 

 

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