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PII 離子交換纖維素使用說明

2015-9-28  閱讀(4516)

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離子交換素的特點

離子交換纖維素是以天然分子為母體,借酯化醚化或氧化等化學反應,引入具有酸堿離子基團而仍有纖維素結構的半合成離子交換劑。離子交換纖維素一般分為陽離子交換纖維素與陰離子交換纖維素。應用較廣的有羥甲基纖維素(CM-C),二乙胺基乙基纖維素(DEAE-C),交聯醇胺纖維素(ECTEOLA-C)和磷酸纖維素 PII。其特點:

1、有極大的表面積和多孔結構。其有效交換基團間的空間地位較大,易于吸附蛋白質等高分子物質。與離子交換樹脂相比,它的交換容量較低(一般為0.2-0.9 毫克當量/克),但對分離蛋白質的高分子物質已很適用。

2、有良好的化學,物理穩定性,使洗脫劑的選擇范圍很廣。

3、吸附生化高分子的結合鍵較松,吸附與解吸條件較緩和,適于易變性的蛋白質、酶、激素的分離純化。

4、分離能力很強,能將一組復雜的混合物逐一分開。

5、能分離純化毫克至可量的純品,適用于規模生產。

離子交換纖維素的交換作用

離子交換纖維素對蛋白質類高分子的吸附作用是通過蛋白質分子與纖維素之間的靜電引力的互相吸引,而在 pH 值低于蛋白質的等電子點時,陰離子交換纖維素則可吸引帶負電荷的蛋白質。顯然改變 pH 值或離子強度也能是蛋白質或離子交換纖維素改變或失去電荷,從而使蛋白質從交換劑上解吸下來。但應在蛋白質的穩定 pH 值范圍內進行。

離子交換纖維素的使用和處理

陰離子交換纖維素 DEAE-C 等主要用于中性和性蛋白質的分離,陰離子交換纖維素 PII, CMC 等主要用于中性或堿性蛋白質的分離。

1、新購的 PII 先用 1M NaOH 調勻,侵泡 5 分鐘,靜置傾去細粉,抽干。

2、加入 4 倍體積 1M HCL 侵泡 1 小時,蒸餾水洗至中性,抽干。

3、用 4 倍體積 1M NaOH 侵泡 1 小時,水洗至中性,抽干。

4、用配制樣品用的緩沖液充分平衡。

PII 再生

先用蒸餾水沖洗干凈后,再用 1M NaOH 洗滌殘留蛋白質,然后用水洗至中性,必要時重復上述處理。陽離子交換纖維素也可以用 0.5 摩爾/升鹽酸和 0.5 摩爾/升氯化鈉混合液再生處理,氯化鈉的加入可防止纖維素在堿性溶液中膨脹而難以過濾。陰離子交換纖維素應避免在 pH 值小于 4 的酸性溶液中放置過久,防止交聯劑的纖維素結構受到破壞而失效。















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