成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司

中級會員·12年

聯系電話

13146220038

您現在的位置: 首頁> 技術文章 > 細胞遷移以及侵襲實驗
中級會員·12年
人:
譚柳
話:
010-62210403
機:
13146220038
真:
86-010-89756821
址:
北京昌平區北七家鎮東沙工業園384號
化:
www.dingguocs.com
站:
m.dingguocs.com
址:
www.dingguocs.com

掃一掃訪問手機商鋪

細胞遷移以及侵襲實驗

2015-7-31  閱讀(3862)

分享:

  遷移實驗(cell migration assay)

 實驗材料
(1)ThinCert插入式細胞培養器: 24-well, 8.0-μm pore membranes (Greiner662638)

(2)細胞培養相關試劑:無血清培養基,10%血清培養基,PBS,0.02%EDTA

(3)固定液:甲醇

(4)染色液:Giemsa染液

(5)封片劑:中性樹膠

(6)其他:小鑷子,棉棒,載玻片,蓋玻片

 操作步驟

(1)所有細胞培養試劑和ThinCert放在37℃溫育;

(2)待測細胞培養至對數生長期,消化細胞,用PBS和無血清培養基先后洗滌一次,

 用無血清培養基懸浮細胞,計數,調整濃度  為2×105 /ml;

(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μl 含10%血清的培養基,上 室加入100-

 150μl細胞懸液,繼續在孵箱培養24小時;

(4)用鑷子小心取出ThinCert,吸干上室液體,移到預先加入約800μl甲醇的孔中,室溫固定30分鐘;

(5)取出ThinCert,吸干上室固定液,移到預先加入約800μl Giemsa染液 的孔中,室溫染色15-30分鐘;

(6)輕輕用清水沖洗浸泡數次,取出ThinCert,吸去上室液體,用濕棉棒小 心擦去上室底部膜表面上的細胞;

(7)用小鑷子小心揭下膜,底面朝上晾干,移至載玻片上用中性樹膠封片;

 (8)顯微鏡下取9個隨機視野計數,統計結果。

  注意事項

(1)根據待測細胞體積大小選擇合適孔徑的ThinCert。常用的為8.0-μm孔徑(如

  AGS細胞),如果細胞體積較大可以考慮用10-μm孔徑;

(2)根據待測細胞的遷移能力強弱調整細胞數和遷移時間。常規24-well  ThinCert接種細胞數約

 為2≈5×104/well, 遷移時 間 12≈36小時;

(3)由于Greiner公司的24-Transwell內含24個獨立的ThinCert,為了避免操作污染,

 每次實驗可預先另準備一塊24孔普通培養板(Greiner);

(4)如果細胞遷移能力較弱,下室液體可用3T3細胞無血清培養24小時獲得 的上清加50μg/ml FN(Fibronectin),

 具體可查  閱相關文獻;

(5)細胞懸液加入膜中央,盡量保證液面水平;

(6)固定染色擦洗時動作小心,避免擦去膜底面的細胞。但一定要充分擦凈膜 表面上未遷移的細胞,

 以免影響讀數。尤其是  膜周邊上可用細牙簽或小鑷子纏上濕棉花擦洗,但要小心避免將膜戳破;

(7)Chamber和膜上都無法標記,操作時應小心避免混淆實驗組和對照組;

(8)充分晾干,避免殘留水分導致鏡下聚焦不一致。



會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
產品對比 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪

對比框

在線留言
主站蜘蛛池模板: 欧美日韩人成综合在线| 欧美日韩在线资源| 无毒的成人网| 精品麻豆剧传媒AV国产| 在线毛片观看| 国产精品一区在线麻豆| 免费观看全成年网站| 国产精东天美AV影业传媒| 午夜福利精品国产| 91黄色在线观看网站| 亚洲AV无码一区东京热在线播放| 三级黄色毛片网站| 国产又大又黑又粗免费视频| 亚洲av色香蕉一区二区蜜桃| 午夜福利麻豆国产精品| 亚洲精品无码一区二区三区四虎| 久久国产乱子伦精品免费女人| 亚洲精品一区二区三区四区久久| 国产不卡视频一区二区三区| 亚洲 欧洲 国产 日产 综合| 最新欧美精品一区二区三区| 韩国偷拍女厕里的每个洞洞| 国产精品看久久久无码| 无码天堂亚洲国产AV久久| 久久久黄色大片| 蜜色欲多人AV久久无码| A片无码午夜久久久涩涩| 在线看av的网站| 成人夜色视频网站在线观看| 亚洲国产二三区天堂| 国产精品一区二区三区久久| 亚洲午夜久久久无码精品网红A片| 久久艳务乳肉豪妇荡乳A片| 亚洲精品一区二区另类图片| 国产亚洲欧洲一区二区| 91热久久免费频精品黑人99| 神马午夜午视频| 出差被公舔到高潮| 亚洲成av人综合| 免费国产一级特黄aa大| 亚洲 欧美 国产精品|