成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司

中級會員·12年

聯系電話

13146220038

您現在的位置: 首頁> 技術文章 > 細胞遷移以及侵襲實驗
中級會員·12年
人:
譚柳
話:
010-62210403
機:
13146220038
真:
86-010-89756821
址:
北京昌平區北七家鎮東沙工業園384號
化:
www.dingguocs.com
站:
m.dingguocs.com
址:
www.dingguocs.com

掃一掃訪問手機商鋪

細胞遷移以及侵襲實驗

2015-7-31  閱讀(3862)

分享:

  遷移實驗(cell migration assay)

 實驗材料
(1)ThinCert插入式細胞培養器: 24-well, 8.0-μm pore membranes (Greiner662638)

(2)細胞培養相關試劑:無血清培養基,10%血清培養基,PBS,0.02%EDTA

(3)固定液:甲醇

(4)染色液:Giemsa染液

(5)封片劑:中性樹膠

(6)其他:小鑷子,棉棒,載玻片,蓋玻片

 操作步驟

(1)所有細胞培養試劑和ThinCert放在37℃溫育;

(2)待測細胞培養至對數生長期,消化細胞,用PBS和無血清培養基先后洗滌一次,

 用無血清培養基懸浮細胞,計數,調整濃度  為2×105 /ml;

(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μl 含10%血清的培養基,上 室加入100-

 150μl細胞懸液,繼續在孵箱培養24小時;

(4)用鑷子小心取出ThinCert,吸干上室液體,移到預先加入約800μl甲醇的孔中,室溫固定30分鐘;

(5)取出ThinCert,吸干上室固定液,移到預先加入約800μl Giemsa染液 的孔中,室溫染色15-30分鐘;

(6)輕輕用清水沖洗浸泡數次,取出ThinCert,吸去上室液體,用濕棉棒小 心擦去上室底部膜表面上的細胞;

(7)用小鑷子小心揭下膜,底面朝上晾干,移至載玻片上用中性樹膠封片;

 (8)顯微鏡下取9個隨機視野計數,統計結果。

  注意事項

(1)根據待測細胞體積大小選擇合適孔徑的ThinCert。常用的為8.0-μm孔徑(如

  AGS細胞),如果細胞體積較大可以考慮用10-μm孔徑;

(2)根據待測細胞的遷移能力強弱調整細胞數和遷移時間。常規24-well  ThinCert接種細胞數約

 為2≈5×104/well, 遷移時 間 12≈36小時;

(3)由于Greiner公司的24-Transwell內含24個獨立的ThinCert,為了避免操作污染,

 每次實驗可預先另準備一塊24孔普通培養板(Greiner);

(4)如果細胞遷移能力較弱,下室液體可用3T3細胞無血清培養24小時獲得 的上清加50μg/ml FN(Fibronectin),

 具體可查  閱相關文獻;

(5)細胞懸液加入膜中央,盡量保證液面水平;

(6)固定染色擦洗時動作小心,避免擦去膜底面的細胞。但一定要充分擦凈膜 表面上未遷移的細胞,

 以免影響讀數。尤其是  膜周邊上可用細牙簽或小鑷子纏上濕棉花擦洗,但要小心避免將膜戳破;

(7)Chamber和膜上都無法標記,操作時應小心避免混淆實驗組和對照組;

(8)充分晾干,避免殘留水分導致鏡下聚焦不一致。



會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
產品對比 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪

對比框

在線留言
主站蜘蛛池模板: 久久久久久久久久久艹| 欧美激情欧美激情| 久久无码AV亚洲精品色午夜| 韩国论理片年轻的妈妈| 麻豆视传媒短视频| 狠狠干美女婷婷综合| 亚洲国产欧美中文手机在线| 日韩v亚洲v欧美v精品综合| 久久AV无码精品人妻系列试探| 欧美性video高清精品| 欧美日韩麻豆国产| 日本无码色情影片在线看| 日韩不卡一级片| 久久人妻熟女一区二区| 99国产精品久久久久久久夜| 国产成人精品三级在线| 99国产精品久久久久久久夜| 久久久久久久999| 午夜精品人妻无码一区二区三区| 边走边cH肉哭娇妻1v1| 亚洲国产网站| 麻豆传煤网站免费入口ios| 日韩在线亚洲精品| 色欲AV久久一区二区| 亚洲精品中文字幕一区二区三区| 国产瑜伽白皙一区二区| 久久精品国产亚洲av电影网| 男人天堂av免费观看| 噜噜AV亚洲一区二区| 国产粉嫩泬无套进入A片唱戏| 国产精品亚欧美一区二区三区| 久久精品国产亚洲av热片| 忘忧草在线影院WWW日本动漫| 亚洲精品伊人久久久大香| 国产精品 亚洲 欧美| 久久久久久久久久久久精| 伦理片飘花手机在线| 肉多NP 巨H校园| 亚洲品质自拍网站| 日本一级特黄大片欧美黑寡妇| 视频在线观看一区|