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北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司
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PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與*的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。
一、標(biāo)本交叉污染源：
收集標(biāo)本的容器：標(biāo)本放置時(shí)，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染；
吸樣槍：標(biāo)本核酸模板在提取過程中，由于污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染；
氣溶膠：zui可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式。在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管，開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48000拷貝，因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問題。
二、PCR試劑污染源：
由于在PCR試劑配制過程中，由加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液等污染而導(dǎo)致的PCR試劑污染。
三、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染源：
PCR反應(yīng)中zui主要zui常見的污染源。由于PCR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽性。
四、克隆質(zhì)粒污染源：
克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高，活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒，由于活細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖的簡(jiǎn)便性及具有很強(qiáng)的生命力。故在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽性對(duì)照的檢驗(yàn)室污克隆質(zhì)粒污染能性也很大。
