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純水對于HPLC的影響

閱讀:1104        發布時間:2013-12-19

純水對于HPLC的影響

液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一種有效可靠的技術,目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLCzui常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。

顆粒

顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它,這會導致回壓增大。顆粒還會表現為另一種固相,可能改變樣品的組分。

有機物

超純水中的有機物可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導致鬼峰、還可能改變固定相的選測性以及影響色譜基線。

離子

離子濃度的改變會影響分離結果,部分能吸收UV的離子會對峰產生影響。某些有腐蝕性離子的還會降低高壓輸液泵等配件的使用壽命。

膠體

膠體會不可逆的吸附在固定相上面,影響柱的分離效果。

微生物

微生物會堵塞色譜柱,其代謝產物會增加有機物,顆粒等污染物。

瓶裝純凈水和蒸餾水是目前部分HPLC分析中使用的純凈水,由于瓶裝純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是超純水,水中仍含有少量離子和有機物等雜質,用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱,也影響HPLC定出平坦的基線。

瓶裝純凈水的純化工藝,通常包括吸附、過濾、反滲透等,對顆粒性有機物的去除效果較好,但對微量離子及有機物的去除卻不能滿足高靈敏度的HPLC實驗之需求,并且,由于其包裝通常多為PVC瓶,透氧率高,同時存在一定的化學溶出量,從而污染瓶中的純凈水,尤其是保存一段時間后,水質下降更多,因此表現在HPLC色譜圖上,雖無特定吸收峰,但基線存在較嚴重的不穩干擾。

蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水。可分一次和多次蒸餾水。水經過一次蒸餾,不揮發的組分殘留在容器中被除去,揮發的組分進入蒸餾水的初始餾分中,通常只收集餾分的中間部分,約占60%,要得到更純的水,可在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液,除去有機物和二氧化碳;加入非揮發性的酸(硫酸或磷酸),使氨成為不揮發的銨鹽。通過對雙蒸水進行HPLC檢測時發現,254nm214nm22-27分鐘時都出現較強的吸收峰,這表明有疏水性較強的有機物污染,其原因應是蒸餾過程的共沸現象導致了某些揮發性有機物去除不*。

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