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生物顯微鏡的一些光學(xué)技術(shù)參數(shù)

時(shí)間:2012-3-9閱讀:2592
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中儀光科作為徠卡顯微鏡在中國地區(qū)的經(jīng)銷商,為北京顯微鏡購買者提供zui的服務(wù).

生物顯微鏡的一些光學(xué)技術(shù)參數(shù):


  在鏡檢時(shí),人們總是希望能得到清晰而明亮的理想圖像,這就需要顯微鏡的各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù)達(dá)到一定的標(biāo)準(zhǔn),并且要求在使用時(shí),必須根據(jù)鏡檢的目的和實(shí)際情況來協(xié)調(diào)各參數(shù)的關(guān)系。只有這樣,才能充分發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的性能,得到滿意的鏡檢效果。
  生物顯微鏡的光學(xué)技術(shù)參數(shù)包括:數(shù)值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場寬度、覆蓋差、工作距離等等。這些參數(shù)并不都是越高越好,它們之間是相互又相互制約的,在使用時(shí),應(yīng)根據(jù)鏡檢的目的和實(shí)際情況來協(xié)調(diào)參數(shù)間的關(guān)系。
  一.?dāng)?shù)值孔徑
  數(shù)值孔徑簡寫NA(蔡司公司的數(shù)值孔徑簡寫CF),數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低(即消位置色差的能力,蔡司公司的數(shù)值孔是代表消位置色差和倍率色差的能力),的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)科在物鏡和聚光鏡的外殼上。
  數(shù)值孔徑(NA)是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(η)和孔徑角(u)半數(shù)的正玄之乘積。用公式表示如下:NA=ηsinu/2孔徑角又稱“鏡口角",是物鏡光軸上的物體點(diǎn)與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度。孔徑角越大,進(jìn)入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,與焦點(diǎn)的距離成反比。
  生物顯微鏡觀察時(shí),若想增大NA值,孔徑角是無法增大的,*的辦法是增大介質(zhì)的折射率η值。基于這一原理,就產(chǎn)生了水浸系物鏡和油浸物鏡,因介質(zhì)的折射率η值大于一,NA值就能大于一。數(shù)值孔徑zui大值為1.4,這個(gè)數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達(dá)到了極限。目前,有用折射率高的溴萘作介質(zhì),溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。這里必須指出,為了充分發(fā)揮物鏡數(shù)值孔徑的作用,在觀察時(shí),聚光鏡的NA值應(yīng)等于或略大于物鏡的NA值,數(shù)值孔徑與其它技術(shù)參數(shù)有著密切的關(guān)系,它幾乎決定和影響著其它各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)。它與分辨率成正比,與放大率成正比,與焦深成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小。
  二.分辨率
  分辨率又稱“鑒別率",“解像力"。是衡量顯微鏡性能的又一個(gè)重要技術(shù)參數(shù)。生物顯微鏡的分辨率用公式表示為:d=0.61λ/NA式中d為zui小分辨距離;λ為光線的波長;NA為物鏡的數(shù)值孔徑。可見物鏡的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個(gè)因素決定。NA值越大,照明光線波長越短,則d值越小,分辨率就越高。
  1.要提高分辨率,即減小d值,可采取以下措施。降低波長λ值,使用短波長光源。
  2.曾大介質(zhì)η值和提高NA值(NA=ηsinu/2)。
  3.消色差。
  4.增加明暗反差。
  三.放大率
  放大率就是放大倍數(shù),是指被檢驗(yàn)物體經(jīng)物鏡放大再經(jīng)目鏡放大后,人眼所看到的zui終圖像的大小對原物體大小的比值,是物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。放大率也是顯微鏡的重要參數(shù),但也不能盲目相信放大率越高越好,在選擇時(shí)應(yīng)首先考慮物鏡的數(shù)值孔徑。
  四.焦深
  焦深為焦點(diǎn)深度的簡稱,即在使用顯微鏡時(shí),當(dāng)焦點(diǎn)對準(zhǔn)某一物體時(shí),不僅位于該點(diǎn)平面上的各點(diǎn)都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內(nèi),也能看得清楚,這個(gè)清楚部分的厚度就是焦深。焦深大,可以看到被檢物體的全層,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層,焦深與其它技術(shù)參數(shù)有以下關(guān)系:
  1.焦深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔鏡成反比。
  2.焦深大,分辨率降低。
  由于低倍物鏡的景深較大,所以在低倍物鏡照相時(shí)造成困難。在顯微照相時(shí)將詳細(xì)介紹。
  五.視場直徑(Fieldofview)
  觀察生物顯微鏡時(shí),所看到的明亮的原形范圍叫視場,它的大小,是由目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑也稱視場寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場內(nèi)所能容納被檢物體的實(shí)際范圍。視場直徑23zui為科學(xué),大視場容易引起場曲。F=FN/MobF:視場直徑,F(xiàn)N:視場數(shù),Mob:物鏡放大率。視場數(shù)(FieldNumber,簡寫為FN),標(biāo)刻在目鏡的鏡筒外側(cè)。
  由公式可看出:
  1.視場直徑與視場數(shù)成正比。
  2.增大物鏡的倍數(shù),則視場直徑減小。因此,若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌,而換成高倍物鏡,就只能看到被檢物體的很小一部份。
  六.覆蓋差
  生物顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi)。由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn),光線從蓋玻片進(jìn)入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了像差,這就是覆蓋差。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成像質(zhì)量。上規(guī)定,蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為0.17mm,許可范圍在0.16—0.18mm.,在物鏡的制造上已將此厚度范圍的像差計(jì)算在內(nèi)。物鏡外殼上標(biāo)記0.17,即表明該物鏡要求蓋玻片的厚度。
  七.工作距離
  工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。鏡檢時(shí),被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此,它與焦距是兩個(gè)概念,平時(shí)習(xí)慣所說的調(diào)焦,實(shí)際上是調(diào)節(jié)工作距離。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短孔徑角則大。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡,其工作距離小。
 

生物顯微鏡的一些光學(xué)技術(shù)參數(shù)文章由http://www.cnnoptics.com/編輯上傳。  

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