MEM培養基的配制步驟

時間：2012-11-12閱讀：7018

MEM 1L 配方

1配置前準備：配置培養基新制備的milli water。調節pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養基的器皿清洗干凈，并用milli water潤洗兩次。

2.溶解培養基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將干粉培養基倒入燒杯，水洗包裝袋內面兩次，倒入培養液中。磁力攪拌助溶。

3.補加試劑：根據包裝袋說明加入NaHCO3（2.2g），HEPES（2.383,10mmol）、非必需氨基酸（可不加，10ml）。

4.加抗生素：一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml，鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。

5.調pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH調節pH到7.2.

6.過濾除菌：采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中（100或200ml）。過濾后pH值一般上升0.1-0.3.

7.加小牛血清：根據培養基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存（-20度）。臨用前將加入小牛血清10%。

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