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技術文章

恒遠告訴您“血清”的秘密

閱讀:1277          發布時間:2014-6-20

      在科研實驗室里血清是一個很常見的東西,它可以用作動物免疫,血清IgG制備,病理組化封閉,ELISA實驗樣本等等。一個很常見的的東西您是否真正了解它?現恒遠告訴您有關它的幾個秘密:

保存條件:

血清應保存在-5℃至-2℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

如何解凍血清才不會使產品質量受損?

將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。

避免產生沉淀物

1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產生沉淀物。

2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生

3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。

4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。

5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。

何謂熱滅活?

一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。

有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37C環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

 

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