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主要采用胸腔穿刺法收集實驗動物的胸水，也可處死實驗動物剖開胸腔采集胸水。
1、穿刺點定位
于實驗動物腋后線第11～12肋間隙穿刺，穿刺針緊貼肋骨上緣，否則容易損傷肋間神經。也可在胸壁近胸骨左側緣第4～5肋間隙穿刺。
2、穿刺方法
收集胸水常采用穿刺法。如果實驗不要求動物繼續存活，也可用處死動物剖胸取胸水。穿刺部位在動物脊側腋后線胸壁第11～12肋間隙穿刺較安全。此部位是肺zui下界之外側，既可避免損傷肺組織造成氣胸，又易采集在隔肋竇的胸水。此外，也可在腹側胸壁近胸骨左側緣第4～5肋間隙穿刺。如果有條件在穿刺針頭與注射器之間連一個三通管，但應注意正確運用三通管。
實驗動物取立位或半臥位固定，局部皮膚去毛、消毒、麻醉，穿刺針頭與注射器之間接三通連接裝置，實驗人員以左手拇指、食指繃緊局部皮膚，右手用帶夾的橡皮管套上12～14號針頭，沿肋骨前緣小心地垂直刺入（緊靠肋骨下緣處垂直進針），穿刺肋間肌時產生一定阻力，當阻力消失有落空感時，說明已刺入胸膜腔，用左手固定穿刺針，打開三通連接裝置，緩慢抽取胸水。穿刺結束迅速拔出針頭，輕揉穿刺部位，促進針孔閉合并注意消毒。
操作中嚴防空氣進入胸腔，始終保持胸腔負壓。穿刺應用手控制針頭的深度，以防穿刺過深刺傷肺臟。