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技術(shù)文章

ELISA試劑盒之酶標(biāo)基本步驟是什么?

閱讀:2066          發(fā)布時(shí)間:2019-12-16

    ELISA試劑盒中的酶標(biāo)用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

    1.包被用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μgml。
在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml4℃過夜。次日棄去孔內(nèi)溶液用洗滌緩沖液洗3次每次3分鐘。(簡稱洗滌下同)。

    2.加樣加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。

    3.加酶標(biāo)抗體于各反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.51小時(shí)洗滌。

    4.加底物液顯色于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml37℃1030分鐘。

    5.終止反應(yīng)于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6.結(jié)果判定可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果,反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng);陰性反應(yīng)為無色或極淺。

    依據(jù)ELISA試劑盒檢測所呈顏色的深淺以“+”、“-”號(hào)表示。也可測O·D值在ELX808酶標(biāo)儀上于450nm(若以ABTS顯色則410nm)處以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O·D值若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍即為陽性。

Cytological, physiological, and transcriptomic analyses of golden leaf

coloration in Ginkgo biloba L

Li et al. Horticulture Research (2018) 5:12

DOI 10.1038/s41438-018-0015-4

作者單位:揚(yáng)州大學(xué)

使用產(chǎn)品:有機(jī)氯ELISA試劑盒

 

3. Starvation during pregnancy impairs fetal oogenesis and folliculogenesis in offspring in the mouse

Wang et al. Cell Death and Disease (2018) 9:452

DOI 10.1038/s41419-018-0492-2

作者單位:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)

使用產(chǎn)品:雌二醇ELISA試劑盒

 

Tissue factor pathway inhibitor gene transfer prevents vascular smooth muscle cell proliferation by interfering with the MCP-3/CCR2 pathway

Laboratory Investigation (2015) 95, 1246–1257

© 2015 USCAP, Inc All rights reserved 0023-6837/15

作者單位:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)

使用產(chǎn)品:溴脫氧核苷尿嘧啶ELISA試劑盒

 

Toxicity of glyphosate in feed for weanling piglets and the mechanism of glyphosate detoxification by the liver nuclear receptor CAR/PXR pathway

Journal of Hazardous Materials,Available online 16 November 2019, 121707

doi.org/10.1016/j.jhazmat.2019.121707

作者單位:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)

使用產(chǎn)品:SOD, GSH-Px, GST, CAT, GSH and MDA ELISA試劑盒

 

 Enhancing methane production of anaerobic sludge digestion by

microaeration: Enzyme activity stimulation, semi-continuous reactor

validation and microbial community analysis

Bioresource Technology,Volume 289, October 2019, 121643

doi.org/10.1016/j.biortech.2019.121643

作者單位:上海電力大學(xué)

使用產(chǎn)品:α葡萄糖苷酶ELISA試劑盒

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