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伯樂電泳槽電場通過凝膠連接兩個緩沖腔
閱讀：827 發布時間：2021-5-27
根據電泳的原理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。緩沖液和凝膠之間的接觸可以是直接的液體接觸，也可以間接通過凝膠條或濾紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場，但在裝置設計上有一些困難，如液體泄漏，電安全和操作麻煩等問題。水平板狀電泳槽大多通過間接方式，用濾紙橋搭接。
以及最近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接，即半干技術，后種方式使裝置簡化，操作也大大方便。
伯樂電泳槽常見問題及解決辦法：
1、伯樂電泳槽紋理和托尾現
由于樣品溶解不佳引起的，克服的方法可以在加樣前離心，增加一些增溶輔助試劑如尿素。
2、蛋白帶過寬
與鄰近泳道的蛋白帶相連時由于加樣量太多，可以減少上樣量。
3、伯樂電泳槽電泳時間比正常要長
可能由于凝膠緩沖系統和電極緩沖系統的PH選擇錯誤，即緩沖系統的PH和被分離物質的等電點差別太小，或緩沖系統的離子強度太高。
4、指示劑成微笑符號（指示劑前沿呈現向上的曲線形）
說明凝膠的不均勻冷卻，中間部分冷卻不好，導致分子有不同的遷移率所致。
5、指示劑成哭臉符號（指示劑前沿呈現向下的曲線形）
由于電泳槽的裝置不合適，尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不*。
6、伯樂電泳槽凝膠時間不對
通常膠在60min，1H內凝，如果凝的太慢，可能是TEMEN，APS劑量不夠或者失效。APS應該現配現用，TEMED不穩定，容易被氧化成黃色。如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量過多，此時膠太硬易裂，電泳時易燒膠。