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上海起發實驗試劑有限公司

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abbexa abx150340說明書

2022-10-13  閱讀(1228)

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abbexa abx150340說明書

Epitestosterone (ET) ELISA Kit

表睪酮 (ET) ELISA 試劑盒

Catalogue No: abx150340

Epitestosterone (ET) ELISA Kit 是一種 ELISA 試劑盒,用于體外定量測量血清、血漿和其他生物體液中的 Epitestosterone 濃度。該方法對檢測表睪酮 (ET) 具有高靈敏度和出色的特異性,未觀察到表
睪酮 (ET) 和類似物之間存在顯著的交叉反應或干擾。

目標表睪酮
反應性一般(所有物種)
測試應用酶聯免疫吸附試驗
推薦稀釋稀釋度/濃度應由最終用戶確定。
貯存在 4 °C 下運輸。收到后,按照套件手冊中的存放說明存放套件。
有效性該套件的有效期為 6 個月。
穩定試劑盒的穩定性取決于活性損失率。在適當的儲存條件下,保質期內損失率小于5%。為了盡量減少性能波動,應嚴格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個測定由同一用戶自始至終執行。
測試范圍123.5 皮克/毫升 - 10000 皮克/毫升
靈敏度< 50.5 皮克/毫升
標準格式凍干
檢測方法比色法
檢測類型競爭的
檢測數據定量的
樣品類型血清、血漿和其他生物體液。
目標類型抗原
測定原理該試劑盒基于競爭性酶聯免疫吸附測定技術。將抗體預涂在 96 孔板上。將標準品、測試樣品和生物素結合試劑添加到孔中并孵育。生物素標記的 ET 和預包被抗體上未標記的 ET 之間發生競爭性抑制反應。然后加入 HRP 偶聯試劑,并孵育整個板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的結合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反應。加入 TMB 底物后,只有含有足夠 ET 的孔才會產生藍色產物,加入酸性終止液后變為黃色。黃色的強度與板上結合的 ET 量成反比。
套件組件列出的套件組件僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 預涂層 96 孔微孔板

  • 標準

  • 標準稀釋緩沖液

  • 洗滌緩沖液

  • 檢測試劑A

  • 檢測試劑B

  • 稀釋劑 A

  • 稀釋劑 B

  • TMB基板

  • 停止解決方案

  • 封板機

需要但未提供的材料
  • 37°C 培養箱

  • 多通道和單通道移液器和無菌移液器吸頭

  • 噴瓶或自動微孔板清洗機

  • 1.5 毫升試管

  • 蒸餾水

  • 吸水濾紙

  • 100 毫升和 1 升量筒

  • 酶標儀(波長:450 nm)

  • ELISA 搖床

試劑制備此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 1) 標準品:用推薦體積的標準稀釋緩沖液配制標準品,制成標準溶液。然后按照協議中的說明,使用標準稀釋緩沖液對標準溶液進行系列稀釋。

  • 2) 洗滌緩沖液:按照方案中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。

  • 3) 檢測試劑制備:計算所需工作溶液的總體積。分別用稀釋劑 A 和稀釋劑 B 以 1:100 稀釋檢測試劑 A 和檢測試劑 B。

檢測程序此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 1) 設置標準、測試樣品和對照孔。

  • 2) 將 50 µl 稀釋標準品分裝到標準孔中。

  • 3) 將 50 µl 標準稀釋緩沖液分裝到對照(零)孔中。

  • 4) 將 50 µl 稀釋樣品分裝到樣品孔中。

  • 5) 立即將 50 µl 檢測試劑 A 分裝到每個孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時。

  • 6) 洗滌 3 次。

  • 7) 將 100 µl 檢測試劑 B 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 8)洗滌5次。

  • 9) 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。

  • 10) 分裝 50 µl 終止液。

  • 11) 在 450 nm 處測量 OD。

協議此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 使用前將套件組件和樣品平衡至室溫 (18 - 25 °C)。建議為每個測試繪制標準曲線。

  • 1. 在預涂板上分別設置標準孔、測試樣品孔和對照(零)孔,然后記錄它們的位置。建議至少測量每個標準和樣品一式兩份。

  • 2. 將 50 µL 每種標準品、質控品和樣品加入相應的孔中。

  • 3. 取下蓋子并丟棄液體。

  • 4. 立即分裝 50 µl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 1 小時。

  • 5. 取下蓋子并丟棄溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌板 3 次。

  • 6. 每孔加入 100 µL 檢測試劑 B 工作溶液,密封并在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 7. 棄去溶液并用洗滌緩沖液洗滌板 5 次,如上一步所述。

  • 8. 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考,最佳時間應由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。

  • 9. 每孔加入 50 µL 終止液。立即在 450 nm 處讀取。

結果計算該測定具有競爭力,因此樣品中的 ET 濃度與測得的吸光度之間存在負相關。使用標準濃度(y 軸)和測量的平均吸光度(x 軸)的對數創建圖表。通過標準點應用最佳擬合趨勢線。樣品的 ET 濃度可以從標準曲線中插值。
分析精度Intra-assay Precision (Precision within an assay):在一個板上分別測試了 3 個低、中、高水平表睪酮的樣品 20 次。
測定間精密度(測定間精密度):在 3 個不同的平板上測試 3 個具有低、中和高水平表睪酮的樣品,每個平板 8 個重復。
CV (%) = (標準偏差/平均值) × 100
測定內:CV<10%
測定間:CV<12%
可用性5-7 個工作日內發貨。
筆記本產品僅供研究使用。范圍和靈敏度可能會發生變化。請聯系我們獲取最新的產品信息。為了獲得準確的結果,樣品濃度必須稀釋至試劑盒的中間范圍。如果您需要特定范圍,請提前聯系我們或在您的訂單評論中寫下您的要求。請注意,我們的 ELISA 和 CLIA 試劑盒針對天然樣品而非重組蛋白的檢測進行了優化。我們無法保證檢測到重組蛋白,因為它們可能具有與天然蛋白不同的序列或三級結構。




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