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PROTEOfectene®和PROTEOfectene® AB是含有 Proteofectene®AB 的脂質(zhì)制劑，專為抗體的蛋白轉(zhuǎn)染而開(kāi)發(fā)。

您感興趣的蛋白質(zhì)或抗體中存在的任何雜質(zhì)、污染物或添加劑都可能影響PROTEOfectene®或PROTEOfectene® AB 的遞送效率。因此，使用盡可能純的蛋白質(zhì)/抗體。
如果與感興趣的蛋白質(zhì)相比存在過(guò)多的穩(wěn)定劑，例如去污劑，則可以抑制遞送。穩(wěn)定劑如甘油或其他類似的添加劑不會(huì)干擾蛋白質(zhì)的傳遞。

抗體溶液中的 BSA 會(huì)抑制抗體遞送！0.1% 到 2% BSA 是抗體溶液中的常見(jiàn)濃度——這意味著 1 mg/ml 到 20 mg/ml。在這些溶液中，BSA 的比例大大超過(guò)了抗體。BSA 在抗體PROTEOfectene® AB 復(fù)合物形成期間與抗體競(jìng)爭(zhēng)，因此抑制抗體遞送。

如果防腐劑如疊氮化納以高濃度存在，則可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞毒性。如有必要，可通過(guò)透析去除。

PROTEOfectene®是一種基于脂質(zhì)的制劑，可與蛋白質(zhì)形成非共價(jià)復(fù)合物。這些復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)化，蛋白質(zhì)被釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
只需將您感興趣的蛋白質(zhì)與PROTEOfectene®在 1xPBS 中孵育10-15 分鐘，用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋，然后將混合物應(yīng)用于您的細(xì)胞，3-48 小時(shí)后，您就可以檢測(cè)蛋白質(zhì)活性了。

由于它們的特定特性，某些蛋白質(zhì)可能無(wú)法通過(guò)PROTEOfectene®有效遞送。因此，在生理?xiàng)l件下帶正電荷的堿性蛋白質(zhì)很難被引入細(xì)胞。另一個(gè)原因可能是前蛋白的雜質(zhì)（例如去污劑、防腐劑、穩(wěn)定劑）。

與使用轉(zhuǎn)染 DNA 的基因表達(dá)研究相比，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染 (Proteofection) 的速度非常快，因?yàn)樗@過(guò)了轉(zhuǎn)錄和翻譯等細(xì)胞過(guò)程。此外，避免了潛在有害的隨機(jī) DNA 整合到目標(biāo)細(xì)胞的基因組中。PROTEOfectene®可以將活性蛋白質(zhì)直接輸送到細(xì)胞中，用于涉及細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡和許多其他因素的各種問(wèn)題的研究。

R-藻紅蛋白 (100 µg/ml) 與PROTEOfectene® 一起提供作為陽(yáng)性對(duì)照。以 1:2 的蛋白質(zhì)：脂質(zhì)比使用它（對(duì)于 1 μg 蛋白質(zhì)，需要2 μl PROTEOfectene®）。
R 藻紅蛋白已被輸送到許多不同的細(xì)胞中，因此成功輸送的可能性很高。提供此對(duì)照蛋白是為了幫助您設(shè)置實(shí)驗(yàn)，并且應(yīng)該用于您實(shí)驗(yàn)的每個(gè)新細(xì)胞系。如果細(xì)胞毒性是一個(gè)問(wèn)題，陽(yáng)性對(duì)照使用戶能夠確定遞送的蛋白質(zhì)是否影響細(xì)胞活力。

FITC 標(biāo)記的 IgG（陽(yáng)性對(duì)照，100 μg/ml）是一種熒光標(biāo)記的抗體（免疫球蛋白）作為陽(yáng)性對(duì)照。以 1:1 – 1:2 的抗體：試劑比例使用（對(duì)于 1 μg 抗體，需要 1-2 μl PROTEOfectene® AB）。提供此對(duì)照抗體是為了幫助您設(shè)置實(shí)驗(yàn)，并且應(yīng)該用于您實(shí)驗(yàn)的每個(gè)新細(xì)胞系。FITC-IgG 已被輸送到許多不同的細(xì)胞中；因此，成功運(yùn)輸?shù)目赡苄院芨摺?/span>