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上海起發實驗試劑有限公司
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fabgennix IGY-1910說明書
Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)
雞 IgY 純化試劑盒
Product no.: IGY-1910
概述 | |
產品 |
雞 IgY 純化試劑盒（10 個蛋黃） |
描述 | 設計用于從雞蛋中快速分離和純化 IgY 的試劑盒。 |
內容 | |
除脂緩沖液（試劑 A） | 1升 |
IgY 沉淀緩沖液（試劑 B） | 1升 |
IgY 重組緩沖液 | 50 毫升 |
IgY 穩定緩沖液 | 50 毫升 |
| 蛋黃分離器 | 1個。 |
IgY 純化試劑盒 - 如何從蛋黃中純化 IgY 抗體
IGY 的分離和純化步驟簡單且在室溫下進行。
新鮮雞蛋被打碎并使用蛋黃分離器分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放蛋黃內容物，可以使用牙簽輕松去除膜。
對于新鮮蛋黃，在不斷攪拌下加入 5 倍體積的試劑 A 的蛋黃重量。注意：如果蛋黃超過 3 天且未冷凍，建議使用 6 倍體積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃。
加入所有試劑后，會形成濃稠的黃色沉淀。繼續攪拌 10 分鐘，并將內容物在 4 ° C下孵育過夜。沉淀會在 1-2 小時內沉淀下來，上清液會變清。
內容物在冷搖擺斗式離心機中以 3500-4000Xg 在 4 ° C 下離心 30 分鐘。
在預冷燒杯中倒出澄清的上清液，并在不斷攪拌下緩慢加入等體積的試劑 B。繼續攪拌 10 分鐘，并將混合物在 4 ° C 下保持 2-4 小時至過夜。1-2 小時內會在底部沉淀出清澈的白色沉淀。
將內容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鐘以收集白色沉淀。
小心地去除所有液體，并使用以下公式在抗體重組緩沖液中重組白色沉淀。對于 10 克蛋黃，添加 2 至 2.5 毫升抗體重組緩沖液。
通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD，按內容定量 IgY。
總 IgY 可儲存在 1:1 比例的抗體穩定緩沖液中，以便在 -40°C 或更低溫度下長期儲存。
儲藏條件
所有試劑在 4oC 下可穩定保存長達 1 年。
一般建議
雞蛋可在 4°C 下長期保存，但建議在使用本試劑盒前將其新鮮裂解以分離 IgY。分離后的蛋黃可在 4°C 下在 0.05% 疊氮化納中儲存數天，而不會顯著降低 IgY 的回收率。蛋黃不應冷凍儲存以用于該試劑盒。
蛋黃中的脂質含量變化很大，有時損壞步驟不會產生清晰的上清液。在這種情況下，可以再添加一倍體積的試劑 A 以*破壞蛋黃。
本產品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷。
