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avidity技術(shù)-體內(nèi)生物素化菌株

2021-6-28  閱讀(2597)

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avidity技術(shù)-體內(nèi)生物素化菌株

 


菌株AVB101菌株 AVB101,一種大腸桿菌 B 菌株(hsdR、lon11、sulA1),含有 pBirAcm,一種 IPTG 誘導(dǎo)型質(zhì)粒,其中含有工程化到 pACYC184 中的 BirA 基因。它與大多數(shù)克隆載體兼容,并用氯霉素 (10 µg/ml) 維持。該菌株被推薦用于蛋白質(zhì)表達(dá),因?yàn)樗L旺盛且不存在 OmpT 和 Lon 蛋白酶。Avidity, LLC 提供三種形式的菌株 - 甘油原液 (AVB101)、化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 (CVB101) 和電感受態(tài)細(xì)胞 (EVB101)。

方案:誘導(dǎo)用于 AviTag™ 蛋白質(zhì)體內(nèi)生物素化的細(xì)菌菌株

下載規(guī)格表:
甘油原液 AVB101

感受態(tài)細(xì)胞 EVB101 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 CVB101

用細(xì)菌菌株進(jìn)行體內(nèi)生物素化 pBirAcm 
pBirAcm.txt
注意BirA 基因位于 2829-3791 bp 
AVB101 圖之間的互補(bǔ)鏈上(用于打印的 pdf 文件)

BIO-500生物素溶液10毫升5mM的d -生物素溶液(10mM N-二羥yi基甘氨酸,pH值8.3)
應(yīng)變AVB99 
DNA酶缺陷型K12大腸桿菌分離質(zhì)粒pBirAcm
應(yīng)變AVB99是K12大腸桿菌菌株(基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1) 含有 pBirAcm,pBirAcm 是一種工程化的 pACYC184 質(zhì)粒,帶有 IPTG 誘導(dǎo)型 birA 基因,可過表達(dá)生物素連接酶。建議使用 endA1 核酸酶缺陷菌株分離 pBirAcm 質(zhì)粒,該質(zhì)粒可用于將其他大腸桿菌菌株轉(zhuǎn)化為生物素連接酶過表達(dá)菌株。pBirAcm 質(zhì)粒應(yīng)保持并用濃度為 10 µg/ml 的氯霉素進(jìn)行篩選(請記住,這是一個(gè)低拷貝數(shù)質(zhì)粒)。Avidity, LLC 提供甘油庫存 (AVB99)

下載規(guī)格表:
甘油庫存 AVB99

STRAIN AVB100 整合的 birA 基因菌株
AVB100,一種大腸桿菌 K12 菌株 [MC1061 araD139 delta (ara-leu)7696 delta(lac)l74 galU galK hsdR2(rK-mK+) mcrB1 rpsL(Strably biR)],是一個(gè)基因整合到染色體中。BirA 蛋白的過表達(dá)是通過用 L-阿拉伯糖誘導(dǎo)實(shí)現(xiàn)的。穩(wěn)定整合的 birA 基因不需要維持抗生素,也不需要將 AVB100 與 IPTG 誘導(dǎo)型載體(如 Avidity 的 pAC 或 pAN)一起使用。AviTag 載體允許獨(dú)立控制表達(dá)的目的基因和 BirA 水平。Avidity, LLC 提供甘油原液 (AVB100) 或電感受態(tài)細(xì)胞 (EVB100)。

請注意:購買的 Strain AVB100 或衍生產(chǎn)品向最終用戶傳達(dá)了有限使用許可。本許可禁止購買者在未獲得 Avidity, LLC 明確書面同意的情況下將本產(chǎn)品出售、轉(zhuǎn)讓或轉(zhuǎn)讓給任何第三方。請?jiān)谫徺I本產(chǎn)品之前查看以下規(guī)格表中的本許可。

下載規(guī)格表:
Glycerol stock AVB100
電感受態(tài)細(xì)胞 EVB100
相關(guān)產(chǎn)品 BIP-300 陽性對照質(zhì)粒 BIP-300BIP-300 是一種含有 N 端 AviTagged ß-半乳糖苷酶 (ß-gal) 基因的質(zhì)粒。質(zhì)粒可用作 AVB101 或 AVB100 中表達(dá)的陽性對照

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