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上海起發實驗試劑有限公司
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一步法恒溫支原體檢測試劑盒-上海起發現貨
品牌：yisemed
貨號：MD001
規格：48Reaction
細胞《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》詳細介紹?
一、《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》主要用途??
《一步法恒溫支原體檢?測試劑盒》主要用于檢測細胞培養上清或別的液體樣品中是否含有支原體污染，該試劑盒僅用于基礎科研。
二、《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》擴增原理??
《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》采用*的恒溫基因擴增技術和顯色技術，對樣品的支原體基因組DNA進行恒溫擴增，反應完后，通過反應管的顏色即可對結果進行判斷。
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三、《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》八大優點??
《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》八大優點
?（1） 方便，整個檢測過程只需一步即可完成。
（2） 省時，整個檢測過程只需1小時，而PCR法通常需要2-3小時。
（3）靈敏度良好，一般比30個循環普通PCR靈敏度高。
（4）無需樣品的前處理。由于細胞培養數天后，培養液中經常含有嚴重抑制PCR擴增的代謝物，所以樣品的前處理一般是PCR法*的環節。而RD-RCA擴增不受抑制，無需樣品的前處理。
（5）無需樣品的離心濃縮，檢測只需1微升培養液即可。
（6）無需用到PCR儀、電泳槽、凝膠成像儀、離心機等儀器，整個檢測只需一個水浴鍋即可完成。
（7）無需電泳，無需接觸EB等誘癌物質。根據反應管的指示劑，肉眼即可判斷反應結果。
（8）產品穩定性好，凍干型產品可以在室溫至少放置2個月，-20 ℃至少可以放置2年。
四、 《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》法與PCR法的靈敏度和抗干擾性比較??
將有支原體污染的細胞培養液上清用水做系列稀釋（RD-RCA做10倍系列稀釋、PCR做5倍系列稀釋），而后分別用《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》和普通PCR進行支原體檢測。
?如右圖所示，采用RD-RCA法的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》在稀釋10000倍后仍呈明顯的陽性而普通PCR(30 cycles)在稀釋125倍后呈勉強的弱陽性，二者靈敏度至少相差80倍。
另外一個值得高度注意的是：用細胞培養上清原液進行PCR檢測居然呈明顯的陰性！而原液用水稀釋5倍后，PCR卻呈陽性。說明：細胞培養上清原液含有強烈抑制PCR的代謝物！
與此形成鮮明對比的是：采用RD-RCA法的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》卻能在細胞培養上清原液中檢測出支原體污染！說明：同樣的代謝產物雖然強烈抑制PCR卻不會抑制RD-RCA的正常擴增。
這是RD-RCA法的巨大優勢！如此，RD-RCA就不需要進行樣品的稀釋或者進行支原體DNA的抽提等的前處理。
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特別提醒：
該實驗也說明：如果使用的PCR法支原體檢測試劑盒沒有內參對照，而直接使用細胞培??養上清原液進行PCR檢測，檢測結果即使為陰性，也不能說明其沒有支原體污染，極有可能是PCR的擴增被細胞的代謝產物抑制了！這個問題絕大部分進行支原體檢測的人員都不會注意，這是利用無內參對照的PCR法進行支原體檢測的致命弱點!
【注：由于本公司現在生產的《PCR法支原體檢測試劑盒》（貨號：PM008），含內參對照，已經可以區分真陰性樣品（樣品無支原體污染。電泳結果：有內參條帶，無支原體特異條帶）和假陰性樣品（PCR被代謝產物抑制。電泳結果：內參條帶和支原體特異條帶都沒有）。詳情請參考本公司生產的《PCR法支原體檢測試劑盒》說明書】
有關PCR的擴增會被細胞的代謝產物抑制的問題，Sigma公司的LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit（貨號MP0035-1 kit）的PCR法支原體檢測試劑盒說明書中也特別提到了這點，其強烈建議用試劑盒進行DNA提取后再進行檢測。可見這是利用PCR法進行支原體檢測過程中普遍遇到的問題，應該引起科研工作者的高度重視！否則，由此引起的假陰性（培養時間越久，概率越高），將使無內參對照的PCR法進行的支原體檢測變得毫無意義！?
五、 《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》產品形式
本公司所有恒溫基因檢測產品主要以凍干品的形式提供（如右圖所示）。《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》同樣以凍干品的形式提供。
采用先進的凍干技術，將所有擴增成分都凍干在一個0.2 mL的PCR管中，使用時只需加入水化液和待測樣品，整個檢測過程一步即可完成，非常簡單。
此外，由于凍干品的穩定性非常好，可以在室溫保存至少2個月，這樣非常方便運輸和儲存，也非常適合在野外或者污染點進行即時檢測。該工藝的創新極大的擴展了相關產品的市場應用前景。
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