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invivogen提供了廣泛的試劑,工程細胞系和測定試劑盒,可滿足您對先天免疫和哺乳動物細胞表達的研究需求。
對于細胞培養,我們提供微生物污染的解決方案,以及選擇性抗生素和內毒素檢測試劑盒。
我們還提供了一個擴展的報告細胞系集合,以監測由細胞因子或模式識別受體(PRR)配體誘導的細胞內信號傳導途徑。
對于主要的PRR信號通路,我們提供相關配體,抑制劑和抗體的家族。
此外,我們提供了多種人類和鼠類基因,細胞啟動子以及用于不同應用的克隆和表達載體的選擇。
細胞轉染
用表達GFP的質粒轉染THP-1細胞
細胞轉染包括將“外源”核酸(例如質粒或siRNA)引入細胞中,以分別過表達或沉默目的基因。轉染可以在各種細胞環境中對特定基因的表達進行功能評估。根據核酸的類型以及細胞的類型,可以使用許多不同的轉染方案。轉染的三種主要方法是化學的(例如陽離子脂質),物理的(例如電穿孔)和生物的(例如病毒轉導)。新引入的核酸可以是瞬時存在的,從而該基因僅在有限的時間段內表達而不能復制,也可以穩定地存在,由此該基因整合到受體細胞的基因組中。細胞轉染后
仍難以轉染的細胞(例如免疫細胞)通常會表達能檢測外源核酸的強效胞質傳感器。因此,需要轉染增強劑或加強劑來禁用這些防御,從而有助于促進核酸表達并大大提高轉染成功率。
InvivoGen提供:
- LyoVec™:一種專有的基于陽離子脂質的轉染試劑,屬于磷脂家族。它很容易用于許多細胞系的轉染,例如人類胚胎腎-293(HEK-293)細胞系。
- NATE™:一種核酸轉染增強劑,可提高瞬時和穩定轉染效率。它被設計與轉染試劑和推薦用于難以轉染的細胞(例如人單核細胞和鼠巨噬細胞(分別為THP-1和RAW 264.7))一起使用的技術結合使用。
- 選擇性抗生素:范圍廣泛的高純度和無內毒素的選擇性抗生素,包括彈性蛋白,Zeocin™,嘌呤霉素,G418,潮霉素B金和菌霉素。它們可用于在哺乳動物和細菌細胞中進行選擇 。
invivogen LyoVec說明書
LyoVec™ | 單位大小 | 貨號 |
---|---|---|
用于轉染哺乳動物細胞的陽離子脂質+ 1小瓶的對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物 | 8ml,160次反應 10毫升,200次反應 18毫升,360次反應 20 ml,400次反應 16毫升,320反應 | LYEC-12 |
凍干脂質基轉染試劑
LyoVec™是一種專有的基于陽離子脂質的轉染試劑,屬于磷脂家族。該家族最初被Floch等人描述為在體外和體內使用的有效轉染試劑[1-2]。
LyoVec™的主要成分是磷脂DTCPTA,它與DiPPE偶聯,DiPPE是一種中性脂質,有助于使膜雙層穩定并提高LyoVec™的體外轉染效率。
如何使用LyoVec™
LyoVec ™的應用:
- 陽離子脂質基轉染試劑
- 核酸絡合劑
磷脂的正電荷可使LyoVec™與質粒DNA結合,并且該結構可促進與細胞膜的融合,從而實現有效的DNA傳遞。
另外,LyoVec™可用作核酸絡合劑,以促進細胞進入RNA或基于DNA的寡核苷酸,例如RIG-1配體(例如poly(dA:dT)[3]和poly(I:C) [4])和內體TLR7 / 8配體(例如ssPolyU [5])。該復合步驟對于通過病原體識別受體誘導對核酸的有效應答是至關重要的。
參考
1. Floch等人, 1997。陽離子磷脂作為非病毒載體,可在造血細胞系和CD34 +細胞中進行DNA轉染。血細胞分子與疾病23:69-87。
2. Guillaume-Gable等, 1998。陽離子磷脂作為小鼠肺中非病毒基因轉移劑。嗡嗡聲基因The 9:2309-2319。
3. Xie M.等人, 2016。依賴PKM2的糖酵解促進NLRP3和AIM2炎性體激活。Nat Commun。7:13280。
4.JärverP.等人, 2018。單鏈核酸通過干擾網格蛋白介導的胞吞作用來調節TLR3 / 4/7活化。科學8:15841。
5.片芝等人, 2011年。人髓樣樹突狀細胞中的雙鏈DNA和單鏈RNA分別誘導了干擾素-α和白介素12。免疫學。132(2):165-73。
規格
動手時間:不超過15分鐘,轉染前一天無需任何準備
轉染:瞬時穩定轉染
條件:在有血清的情況下工作,轉染后無需洗滌細胞
保質期:質粒DNA(pDNA)/ LyoVec™復合物的保質期長
質量控制:
- LyoVec™的轉染效率已在HEK293衍生的細胞中得到證實。
- 已經評估了HEK293衍生細胞的細胞毒性。
內容
LyoVec™以凍干粉的形式提供,無菌并包裝在密封的玻璃小瓶中。
該產品有不同的格式:
- lyec-1:5個小瓶(足以在12孔板中進行200個反應)
- lyec-2:10個小瓶(足以在12孔板中進行400個反應)
- lyec-3 :2個大瓶(足以在12孔板中進行320個反應)
- lyec-12:4個小瓶(足以在12孔板中進行160個反應)和1個對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物。
- lyec-22:9個小瓶(足以在12孔板中進行360個反應)和1個對照LyoVec™-GFP / SEAP復合物。