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上海起發實驗試劑有限公司
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ALSTEM是一家位于灣區的早期生物技術公司，擁有快速擴展的產品和服務組合，為生物制藥和學術機構提供服務。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發，ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術專業知識的科學家創立。
hTERT Cell Immortalization Kit: #CILV02
hTERT細胞永生化試劑盒：＃CILV02
描述
*，原代細胞僅在培養中經歷預定的和有限數量的細胞分裂。在有限的群體倍增（其數量因物種，細胞類型和培養條件而異）之后，原代細胞進入一種狀態，即所謂的復制衰老，它們不再分裂。為了超越衰老，存在幾種使培養中的哺乳動物細胞永生化的方法。近發現的細胞永生化方法是通過端粒酶逆轉錄酶蛋白（TERT）的表達。它對受端粒長度影響大的細胞特別有用，包??括許多人類細胞類型。這種蛋白質通常在大多數體細胞中沉默。當外源引入hTERT時，這些細胞能夠通過維持足夠的端粒長度來避免復制性衰老。
產品名稱 | hTERT細胞永生化試劑盒 |
目錄 ＃ | CILV02 |
尺寸 | 5 x20μl |
運輸 | 干冰 |
儲存和穩定性 | 儲存在-80°C（穩定長達6個月）。 |
質量控制 | 包裝的慢病毒構建體作為冷凍的VSV-G假型病毒顆粒提供。通過Clontech的Lenti-X qRT-PCR滴定試劑盒（Cat。＃631235）測量慢病毒的滴度。每批細胞永生化試劑盒在成纖維細胞中進行功能測試。 |
限制使用 | 僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序。 |
- 概觀
用含有hTERT的重組慢病毒感染細胞，用嘌呤霉素篩選產生自己的永生化細胞
- 程序
- 將靶細胞以1-2×10 5個細胞/孔的密度鋪在6孔板的一個孔中。
- 第二天，將濃縮的重組慢病毒在37℃水浴中解凍，并在解凍時立即將其從浴中取出。
- 在4μlTransPlus試劑（ALSTEM，目錄號V050）存在下，用4-20μl/孔上清液感染6孔板中的靶細胞。
注意：TransPlus試劑是一種聚陽離子，可中和電荷相互作用，從而增加假病毒衣殼與細胞膜之間的結合。 - 第二天，去除病毒上清液并將適當的*生長培養基加入細胞中并在37℃下孵育。
- 孵育72小時后，將細胞繼代培養到2×100mm培養皿中并加入適量的嘌呤霉素以穩定細胞系產生。
- 選擇后10-15天，挑選克隆進行擴增，篩選陽性克隆。
注意：解凍后，我們建議不要將上清液再次冷凍以備將來使用，因為病毒滴度會顯著下降
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
VB100 | ViralBoost | 1毫升 | alstembio |
VC100 | 慢病毒沉淀解決方案 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 | alstembio |
V020 | TransPlus™病毒轉導增強劑 | 100μl/500μl | alstembio |
CILV02 | hTERT細胞永生化試劑盒 | 5 x20μl | alstembio |
上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商
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