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NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell Line
NFAT熒光素酶記錄Jurkat T穩定細胞系
| Product Name | Catalog # |
|---|---|
| NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell Line | SL-0032-FP |
描述：
NFAT響應性熒光素酶報告基因Jurkat T穩定細胞系來自人T淋巴細胞，并在NFAT響應元件的控制下穩定表達螢火蟲熒光素酶報告基因。該細胞系是用于監測由刺激治療，強制基因表達和基因敲除引發的鈣信號通路的激活的理想細胞模型。
原理
NFAT是轉錄因子家族，在免疫反應以及心臟，骨骼肌和神經系統的發育中起重要作用。NFAT受鈣信號調節。通過磷酸酶鈣調神經磷酸酶的鈣激活，NFATc蛋白從細胞質轉移到細胞核中，與其他蛋白質配合以介導基因表達。NFAT的核進口被PKA和GSK3等激酶阻斷。NFATs也涉及乳腺癌。Signosis已經建立了已經用NFAT-熒光素酶報告基因構建體穩定轉染的NFAT熒光素酶報道細胞系。通過熒光素酶的分析，細胞系可用于監測由刺激，復合治療，強制基因表達或基因敲低引發的NFAT活性的細胞變化。
通過使用含有NFAT結合位點，螢火蟲熒光素酶編碼區上游的zui小啟動子以及潮霉素表達載體，然后潮霉素選擇的pTA-NFAT-熒光素酶報道載體轉染建立細胞系。隨后對潮霉素抗性克隆進行PMA +離子霉素誘導的熒光素酶活性篩選。
TF熒光素酶報告原理。 TF熒光素酶報道穩定細胞株利用人工啟動子構建體來驅動熒光素酶表達。啟動子區域可以由順式元件TF結合位點的多個重復序列，來自已知TF下游基因的啟動子區域的DNA片段或含有推定/已知的TF結合位點的DNA片段組成。TF可以通過細胞外刺激或通過細胞內信號傳導途徑激活幾種方式。一旦激活，TF易位于細胞核，并經常與相關因子相互作用以驅動基因表達。一旦熒光素酶表達，其可以在酶測定中產生光，并且測量的光量與TF活化的水平正相關。
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