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AR Luciferase Reporter MDA-MB-453 Stable Cell Line
AR熒光素酶報告基因MDA-MB-453穩定細胞系
| 品名 | 貨號 |
|---|---|
| AR Luciferase Reporter MDA-MB-453 Stable Cell Line | SL-0008-FP |
描述：
AR響應性熒光素酶報告基因MDA-MB-453穩定細胞系來自人乳腺癌，并在AR反應元件的控制下穩定表達螢火蟲螢光素酶報告基因。該細胞系是一種理想的細胞模型，用于監測由激素治療，強制基因表達和基因敲除引發的雄激素受體途徑的激活。
原理
雄激素受體（AR）在男性生殖器官的發育中起關鍵作用。當被刺激激活時，AR從細胞質轉移到核中，然后結合DNA識別位點并調節基因表達。Signosis已建立了AR熒光素酶報告基因穩定細胞系，其中熒光素酶活性與AR的活性特異性相關。因此，細胞系可用作監測由刺激治療引發的AR的激活的報告系統，強制基因表達和/或基因敲低。通過轉染AR熒光素酶報道載體與G418表達載體，然后G418選擇建立細胞系。隨后篩選G418抗性克隆，以顯示依托泊苷誘導的熒光素酶活性。選擇具有zui高折疊誘導（22倍）的克隆并擴增以產生該穩定的細胞系。
TF熒光素酶報告原理。 TF熒光素酶報道穩定細胞株利用人工啟動子構建體來驅動熒光素酶表達。啟動子區域可以由順式元件TF結合位點的多個重復序列，來自已知TF下游基因的啟動子區域的DNA片段或含有推定/已知的TF結合位點的DNA片段組成。TF可以通過細胞外刺激或通過細胞內信號傳導途徑激活幾種方式。一旦激活，TF易位于細胞核，并經常與相關因子相互作用以驅動基因表達。一旦熒光素酶表達，其可以在酶測定中產生光，并且測量的光量與TF活化的水平正相關。
數據
分析雄激素受體途徑記錄MDA-MB-453穩定細胞系對刺激的響應。 將細胞用包含10％FBS的DMEM在96孔板上接種過夜。然后在DMEM和0.1％FBS中分別用或不用20nM DHT處理細胞16小時。
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