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尿素瓊脂培養基基礎
點擊次數:874 發布時間:2016-6-1
用途:
用于鑒別腸道菌尿素酶試驗 (GB4789.4-2010,《中華人民共和國藥典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO標準)。
原理:
蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀是緩沖劑;具有尿素酶的細菌分解培養基中的尿素,產生大量的氨,使培養呈堿性,酚紅指示劑在pH6.8時呈黃色,pH8.1呈粉紅色;瓊脂是培養基的凝固劑。
配方(每升):
蛋白胨 1g
氯化鈉 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氫鉀 2g
酚紅 0.012g
瓊脂 12g
zui終pH7.2±0.2
使用方法:
1、 稱取本品21g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,待冷卻至50—55℃,每200mL培養基加入經過濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的zui終濃度為2%。分裝無菌試管,制成斜面。
2、 挑取待檢菌的新鮮純培養物,濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上,置36±1℃培養24h。
3、 于2—4h及24h各觀察一次結果。培養基呈現紅色時為陽性反應,顏色不變者為陰性反應。如為陰性可繼續培養觀察至4d。
質量控制:
質控菌株接種后于36±1℃培養24h結果如下 :
菌 名 菌 號 生長狀況 培養特征
普通變形桿菌 HK7131 良好 培養基變紅色
大腸埃希氏菌 ATCC25922 良好 培養基不變色
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規 格:250g