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支原體的培養技巧
點擊次數：902 發布時間：2016-4-14
支原體（霉形體）的培養技巧支原體是介于病毒與細菌之間的一類微生物，在自然界廣泛存在，使人和多種動物、植物害病。
它缺乏細胞壁而不同于細菌，能在無細胞培養基生長繁殖，并含有RNA和DNA而有別于病毒。支原體以二分裂方式繁殖，基本形態為圓形、絲狀形，后者易形成分枝狀菌絲，因而得名支原體。其大小介于病毒和細菌之間，zui小直徑125-250nm，可通過濾器。基因組小只5×108道爾頓，是已知能自行復制繁殖的原核生物中zui小的，因而生物合成能力低，體外培養時需要富含營養，如血清、酵母浸液、核酸等復雜成分的培養基才能生長。它生長緩慢，倍增時間1-6小時，zui長需三周才形成菌落。菌落中心長入瓊脂內部形成中央較密的核，從上方觀察可見“煎蛋樣”的特殊菌落，因為菌落很小需在低倍鏡下才能看見。Mp從發酵葡萄糖取得生長所需能量。Uu則是通過水解尿素獲得能量。支原體對抑制細胞壁合成的青霉類抗生素不敏感，對抑制蛋白質合成的抗生素如四環素和大環內酯類抗生素的紅霉素等敏感。
一般培養比較多的是肺炎支原體（MP），解脲脲原體(UU）是耐酸不耐堿的，UU培養的原理是在于其菌體中含有脲酶，而UU培養基中含有尿素，UU的生長需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長所需要的營養物質，UU培養基中含有指示劑酚紅，由于尿素被分解釋放出氨從而使培養基變堿而使培養基由黃變紅，但是這種紅是一種清亮的紅色，透明澄清無渾濁，UU其適宜的PH值為6.2-6.5，由于尿素分解產氨是PH上升，UU在PH值大于7的條件下會迅速死亡，因此，在培養時要隨時觀察其液體培養基的PH值，一旦看到培養基變紅，要立即取出，以防培養基PH上升導致UU死亡，一般UU需要在培養至對數生長期時是活力zui強的時候（培養基呈橙紅色變化）。一般UU生長需要24小時。