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ELISA試劑盒特異性顯色檢測成功實現(xiàn)
點擊次數(shù)：833 發(fā)布時間：2014-7-16
在ELISA試劑盒中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步，應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作，得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān)，ELISA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
每種試劑都有其*反應(yīng)模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應(yīng)時間長，會造成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋。
作為記錄測定結(jié)果的儀器，酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否，決定結(jié)果的可靠度。首先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng)，對濾光片要定期校正；其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確，使用雙波長，一個檢測波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外，在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同，使用中應(yīng)詳細(xì)閱讀說明書
綜上所述，盡管目前上以及我國有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清（血清盤），但是酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上尚未做到標(biāo)準(zhǔn)化。受方法學(xué)及技術(shù)條件的限制，在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)一定的非特異性，ELISA試劑盒我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，從而提高檢測的特異性，并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
在基因治療中，造血干細(xì)胞因為具有自我更新及分化為各種細(xì)胞系的能力而成為一種很有吸引力的靶細(xì)胞。ELISA試劑盒近年來，將外源目的基因?qū)朐煅杉?xì)胞，以糾正或補償基因缺陷和異常引起的疾病，特別是血液疾病如腺苷脫氨酶缺陷病、血友病、地中海貧血癥及鐮狀細(xì)胞貧血癥中已取得重要的進(jìn)展，然而，在造血干細(xì)胞中實現(xiàn)靶向基因組編輯卻仍然是一個難題。
基因治療為一些因基因缺陷引起的遺傳性疾病提供了良好的治療效果。然而傳統(tǒng)的方法是采用一種遺傳工程載體將突變基因的一個功能拷貝傳送到病變細(xì)胞添加到基因組中。ELISA試劑盒盡管更為先進(jìn)的載體，例如慢病毒載體證實提高了安全性和療效，利用半隨機插入載體存在的插入突變及失控性轉(zhuǎn)基因表達(dá)風(fēng)險仍然令人們感到擔(dān)憂。這些不良效應(yīng)有可能會觸發(fā)癌癥形成、毒性作用或破壞基因修飾細(xì)胞。