液相色譜是打開未知物質世界的大門。科研中的很多問題都能在色譜圖中很好地反映出來。有些問題可以通過改變設備參數來解決，而有些問題必須通過操作程序來修改。畢竟，選擇合適的色譜柱和流動相是獲得良好色譜的關鍵。
在液相色譜分離過程中，我們經常會遇到六個常見的問題。每一個問題都可以通過使用適當的方法來開發策略和工具來避免。
一、峰尾
峰值拖尾
1.屏幕被擋住了
如果色譜柱兩端的濾網堵塞，樣品會在篩板中堵塞形成延遲，樣品在柱后流出時峰形會形成尾部。可以通過反吹塔或更換篩板來解決。
2.折疊列
是指色譜柱因其他原因失去柱效，無法保留物質，使物質不停留在固定相上，隨流動相流出，但仍有一點柱效，從而形成拖尾。可以通過重新加載或替換列來解決。
3.污染
樣本不在同一條起跑線上，從后面跑到最后，露出尾巴。更換色譜柱或用有機溶劑梯度沖洗色譜柱1小時以上即可解決。
4.流動相PH值選擇錯誤
如果某些樣品在一定的pH值下，分子型和離子型之間存在動態平衡，那么離子型會逐漸向分子型呈現拖尾。調節pH值可以抑制分子解離，改善拖尾現象。對于堿性化合物，相對較低的pH值更有利于獲得對稱的峰。
二、高峰前
高峰前
1.樣本過載
保留的樣品在正常峰前持續釋放，形成前峰，從而降低樣品含量。
2.溶劑選擇不當
當樣品溶劑的洗脫能力遠強于流動相時，會出現峰鋒。例如，反相色譜中使用腈作為樣品溶劑時，流動相的洗脫能力較弱。峰鋒會出現。這個問題可以通過選擇流動相或相似比例的流動相作為樣品溶劑來解決。
3.立柱損壞
柱效損失，無物料滯留。只能通過更換色譜柱來解決。
4.一個小峰出現在大峰之前，也就是想象中的鋒峰。即小峰埋在大峰之前，可以通過調節流動相的洗脫梯度來解決。
第三，基線漂移
基線漂移
1.柱溫波動
即使很小的溫度變化也會引起基線波動，這通常會影響差分探測器、電導探測器、低靈敏度紫外探測器或其他光電探測器。可以通過使用柱溫箱和在檢測器前使用熱交換器來控制柱溫度和流動相的溫度來解決。
2.不均勻流動相
條件變化引起的基線漂移大于溫度引起的基線漂移。可以用HPLC級溶劑解決，流動相使用前要脫氣。
3.流動池被污染或有氣體
用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流動池。如有必要，使用1N硝酸(不要使用鹽酸)。4.流量比或流量變化不當
比例或流量。為避免此問題，請定期檢查流動相的成分和流速。
5.樣本中有強烈的保留意見
芋頭峰以逐漸增加的基線形式洗脫。這可以通過使用保護柱來解決。如有必要，在進樣之間或分析過程中，定期用強溶劑清洗色譜柱。
第四，更寬的山峰
更寬的山峰
1.由于色譜柱污染或失效，塔板數減少：更換相同類型的新色譜柱。如果新色譜柱提供對稱的峰，用強溶劑清洗舊色譜柱。
2.色譜柱與檢測器之間的管道過長或管道內徑過大：更換內徑較小的短管道。
3.檢測器對反應時間或池體積的過度響應可以通過縮短響應時間或使用更小的流動池來解決。
五.基線噪音
基線噪聲
1.流動相、檢測器或泵中有空氣(尖峰):確保對流動相進行脫氣，并沖洗系統以去除檢測器或泵中的空氣。
2.泄漏：檢查管接頭是否松動，泵是否泄漏，是否有鹽析和異響。如有必要，更換泵密封件。
3.流動相混合不充分：用手或使用低粘度溶劑充分混合。
4.溫度影響(柱溫過高或檢測器未加熱):使用柱溫箱降低溫差或增加換熱器。
5.同一線路上的其他電子設備(意外噪音):斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自外部，并進行校正。使用精密穩壓電源。
第六，決議不夠充分
分辨率不足
1.流動相梯度洗脫設置不合理：優化梯度洗脫程序。
2.流動相污染或變質(導致保留時間改變):重新配置流動相。
3.保護柱或分析柱堵塞：取下保護柱進行分析，必要時更換；如果分析柱堵塞，可以進行反沖洗；如果問題持續存在，色譜柱可能會被強烈殘留的污染物損壞。再生計劃；如果問題仍然存在，可能是入口堵塞。嘗試更換入口處的濾網或更換色譜柱。
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