關于液相色譜儀色譜柱使用及維護

時間：2015/7/24閱讀：4353

液相色譜儀色譜柱使用及維護

使用卡套柱時，兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時候都不能將卡套取下來，否則會造成填料的流失。

     卡套柱的安裝（加預柱）
     1．將卡套架套入柱芯
     2．將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯（見下圖）
     3．將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
     4．將"子彈頭"預柱放入卡套片內
     5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手擰緊
     6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
     　　平衡色譜柱
     　反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運輸過程中可能會干掉，因此在用流動相分析樣品之前，應使用10－20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱；如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽，應注意用純水"過渡"。
     　　硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相，請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡
     　　如何平衡色譜柱？
     　　平衡過程中，將流速緩慢地提高
     　　用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）
     　　色譜柱的再生　　進行色譜柱再生時，應使用一個謙價的泵，我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。
     　　表1　建議用來沖洗的溶劑體積
     　　注意：
     　　
     在對NH2改性的色譜柱進行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液*流出。

     　　 **如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
     　　色譜柱的維護
     　　 1．使用預柱保護分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）
     　　 2．大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍
     　　 3．避免流動相組成及極性的劇烈變化
     　　 4．流動相使用前必須經脫氣和過濾處理
     　　 5．如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中
     　　 6．壓力升高是需要更換預柱的信號

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